一种基于VIGS系统在油桐中研究杨树功能基因的方法

摘要

本发明属于植物基因工程技术领域，涉及一种基于VIGS系统在油桐中研究杨树功能基因的方法。本发明要解决的技术问题是提供一种简单、高效、低成本研究杨树功能基因的新方法。本发明的技术方案是一种基于VIGS系统在油桐中研究杨树功能基因的方法，包括如下步骤：a、构建载体；b、转化；c、转入油桐；d、检测。本方法简单高效，成本低廉，适合大规模筛选杨树基因的功能。

主权项

一种基于VIGS系统在油桐中研究杨树功能基因的方法，其特征在于：包括如下步骤：a、构建载体：扩增杨树待研究基因片段，与TRV2病毒载体相连接，转化农杆菌GV3101；b、转化：将转后的阳性农杆菌菌液与TRV1菌液按菌体质量比1︰1混合；c、转入油桐：通过注射的方法将混合菌液接种在2～3周大的油桐幼苗嫩叶上，看到叶肉组织中有菌液的扩散即可；d、检测：大约2～3周后，观察注射叶片之上新长出的油桐叶片的表型变化，并检测叶片中TRV病毒的衣壳蛋白基因和转移蛋白基因，检测油桐中被沉默基因的表达情况，最后检测被沉默基因的产物含量，反映基因沉默的程度，最后确定待研究杨树基因的功能。