制备模块融合蛋白表达产物的方法

摘要

本发明涉及制备模块型嵌合蛋白表达产物的方法以及用于所述方法的组合物。具体地说，本发明涉及顺次、定向克隆编码多肽模块的多核苷酸。各可克隆元件或模块含有侧接预定的限制性位点的感兴趣开放读框。这些方法包括利用模块和含有这些模块的载体作为重组DNA技术的起始材料。本发明的优点之一是能快速而方便地制备融合蛋白的许多变体，而无需设计和评估后续的各克隆步骤。

主权项

一种载体，其含有以下每一种元件，这些元件顺次排列而形成模块型开放读框，所述载体包含：a)编码第一组氨基酸的第一限制性位点，其中此第一组氨基酸包括至少两个氨基酸；b)编码感兴趣多肽的第一开放读框，其中此感兴趣多肽的编码序列与上述第一限制位点的至少两个氨基酸的编码序列同在框内；c)编码第二组氨基酸的第二限制性位点，其中此第二组氨基酸包括至少两个氨基酸，其中上述第二限制性位点的第二组氨基酸编码序列与上述第一开放读框的感兴趣多肽编码序列同在框内，其中上述第二限制性位点的多核苷酸序列与第一限制性位点的多核苷酸序列不同；d)间隔臂多核苷酸序列，其中此间隔臂多核苷酸序列编码至少3个间隔氨基酸，其中此间隔臂序列的编码序列与上述第二限制性位点的多核苷酸序列同在框内；和e)编码第三组氨基酸的第三限制性位点，其中此第三组氨基酸包括至少两个氨基酸，其中上述第三限制性位点的第三组氨基酸编码序列与上述至少3个间隔氨基酸的编码序列同在框内，其中上述第三限制性位点的多核苷酸序列与第一限制性位点的多核苷酸序列不同，并且第三限制性位点与第二限制性位点的多核苷酸序列不同；其中元件(a)‑(e)彼此同框相连从而形成模块型开放读框。