激光共聚焦扫描显微镜高分子纤维可视化的制备方法

摘要

本发明涉及一种激光共聚焦扫描显微镜高分子纤维可视化的制备方法，其特征在于包括如下步骤：高分子材料溶解在有机溶剂中，加入荧光染料，进行静电纺丝的制备，得到包裹了荧光染料的高分子纤维；将制备的高分子纤维浸泡在水中，洗去表面残余的荧光染料；进行紫外灭菌；接种上细胞，将细胞用荧光染料标记后，用激光共聚焦显微镜观察。与单纯的细胞激光共聚焦图片对比，有高分子纤维的承托，图像更有空间感、画面得更加真实。运用此方法，可以在同一时间，通过激光共聚焦显微镜直接观察活细胞在高分子纤维上的数量、分布和形态；也可以利用激光共聚焦显微镜配套的活细胞培养舱，在同一位置，连续地直接观察活细胞在高分子纤维上的数量、分布和形态成为可能。

主权项

一种激光共聚焦扫描显微镜高分子纤维可视化的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)高分子材料溶解在有机溶剂中，加热并冷凝回流至共聚物完全溶解，形成溶液I；(2)溶液I中加入荧光染料A，搅拌溶解至完全溶解，形成溶液II；(3)溶液II装入到喷雾装置中的玻璃注射器中，进行静电纺丝的制备，得到包裹了荧光染料A的高分子纤维；(4)所制备的高分子纤维浸泡在水中，常温下恒温摇床摇晃3～7天，以洗去高分子纤维表面残余的荧光染料A；(5)将处理后的高分子纤维进行紫外灭菌处理1～2小时；(6)将灭菌处理的高分子纤维接种上细胞，37℃，5.0％二氧化碳的细胞培养箱中培养；(7)将细胞用荧光染料标记后，用激光共聚焦显微镜观察，可以选择如下方法中的一种：a)将细胞用多聚甲醛或甲醛固定后，用荧光染料B将细胞进行标记，即可通过激光共聚焦显微镜直接观察到高分子纤维及其表面生长的细胞；b)将细胞直接用荧光染料C进行活细胞标记，即可通过激光共聚焦显微镜直接观察到高分子纤维及其表面生长的活细胞；c)将细胞直接用荧光染料D进行活细胞标记，在激光共聚焦显微镜配套的活细胞培养舱中继续培养，即可通过激光共聚焦显微镜时时动态观察高分子纤维及其表面生长的细胞。