酶解白果蛋白制备多肽类活性物质的方法

摘要

本发明公开了一种白果多肽的制备方法，包括以下步骤：原料去壳、去种皮后磨浆、干燥、去脂，去脂白果粉酶水解，酶解液进行膜分离，收集截留液浓缩，溶剂分级沉淀多糖和多肽，多肽沉淀物经过洗涤，冷冻干燥得到多肽干粉。多肽类活性物分子量为3000-10000道尔顿，多肽含量为50～80％，水分＜5％，粒度100～200目。多肽含有人体8种必需氨基酸，同时赖氨酸含量＞7％，组氨酸＞8％，丝氨酸＞11％，天冬氨酸＞14％，谷氨酸＞16％。尤其是天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸和赖氨酸的含量明显高于白果原料，为白果的深加工找到新的途径。此法工艺简单，环境友好，适合工业化生产。

主权项

一种酶解白果蛋白制备多肽类活性物质的方法，其特征在于由以下步骤组成：第一步，制备脱脂白果粉：将新鲜白果去壳，除衣皮，用打浆机在0‑20℃的温度下打浆成膏状，然后用超临界CO2萃取油脂，再在‑10℃‑‑50℃冷冻干燥，破碎，过筛，得到水分的重量百分含量小于5％、粒度为100～200目的脱脂白果粉；第二步，酶水解脱脂白果粉：将所述脱脂白果粉和去离子水按质量比为1∶5～1∶15混合，再向其中添加酶，酶的添加质量为所述脱脂白果粉的5％～20％，加热使混合物温度处于30～60℃下，调节使其pH值处于7～10，搅拌反应3～48h，水解后离心分离，收集上清液；第三步膜分离酶解液，截留分子量为3000‑10000道尔顿多肽类活性物，在0‑30℃下真空浓缩得到浓缩酶解液；第四步多肽的纯化：将质量百分数为50～90％的乙醇或丙酮溶液与所述浓缩酶解液按体积比1‑10∶1混合搅拌，沉淀多糖类物质，离心过滤制得清液，再加入试剂，所述试剂为三氯乙酸、丙酮、(NH4)2SO4中的任何一种或其混合物，所述试剂与所述清液体积比1‑10∶1，并混合搅拌，沉淀得到多肽类活性物；第五步白果多肽粉的制备：将第四步得到的所述多肽类活性物，依次用丙酮、乙醇、甲醇洗涤得到沉淀，沉淀在‑10℃‑‑50℃冷冻干燥，得到白果多肽粉。