甘草药材全时段多波长融合指纹图谱的建立方法

摘要

本发明公开了甘草药材全时段多波长融合指纹图谱的建立方法，它是将现代分析检测手段和信息处理手段结合起来，有效融合中药材指标成分的谱图信息，可以克服单一波长单一指标检测时信息量不足的缺点，从而可以较完善地反映中药材的内在质量。本发明的质量控制方法操作简单、稳定可靠、重现性较好，可用于中药材质量评价和控制及中药新药研发中。特别是可将其作为甘草药材质量控制及真伪鉴别的指标之一。

主权项

甘草药材全时段多波长融合指纹图谱的建立方法，其特征在于该方法按如下步骤进行：（1）供试品溶液的制备：取甘草药材粉末约5g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入水100mL，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液20mL，加在AB‑8树脂柱上，用蒸馏水120mL洗涤，再用100mL95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加20%乙腈使溶解并转移至10mL量瓶中，加20%乙腈定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得；（2）对照品溶液的制备：精密称取甘草酸单铵盐对照品、甘草苷对照品和异甘草苷对照品适量，加甲醇分别制成每1mL含甘草酸单铵盐对照品0.154mg、甘草苷对照品0.587mg和异甘草苷对照品0.362mg的溶液，即得； （3）色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基键合硅胶为填充剂Agilent TC‑C18色谱柱；以0.2‰甲酸水为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱:0~10min为5%~10%B，10~61min为10%~27%B，61~70min为27%~40%B，70~90min为40%~50%B；流速1.0mL/min；柱温30℃；DAD检测器在波长254nm 、279nm和362 nm下同时进行检测；进样量10μL；理论塔板数计算，应不低于3000；（4）全时段多波长融合：采用多波长融合指纹图谱技术将254nm、 279nm和362 nm三个波长下的谱图数据进行全时段融合，得到一张能够同时包含三个波长信息的色谱图；（5）样品含量测定：应用融合后的指纹图谱数据，计算样品中指标成分的含量；（6）对上述确定的含量测定方法进行有效性评价，其中包括专属性、准确度、精密度、重复性、稳定性、线性、范围以及耐用性。