云南红梨PybHLH基因及其原核表达载体和应用

摘要

本发明公开了一种云南红梨花青素生物合成、毛状体发生发育及盐胁迫调控蛋白PybHLH基因及其原核表达载体，本发明利用RT-PCR技术从云南红梨云红梨1号红色果皮中克隆PybHLH基因，然后构建了原核表达载体pGEX-4T-PybHLH，pGEX-4T-PybHLH载体在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达PybHLH蛋白，纯化后，获得云南红梨PybHLH纯化蛋白，本发明还将PybHLH基因原核表达载体应用在制备PybHLH特异性抗体中，获得的PybHLH特异性抗体还用于研究蛋白质与蛋白质以及蛋白质与DNA的相互作用以及对PybHLH转基因植物的检测，本发明获得的PybHLH特异性抗体中含有谷胱甘肽S转移酶（GST），获得的PybHLH特异性抗体运用于FarWesternblotting和免疫共沉淀实验研究蛋白质相互作用以及准确分离获得与PybHLH相互作用的蛋白质和DNA片段。

主权项

云南红梨PybHLH基因，其特征在于：PybHLH基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示或编码如SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列的蛋白质。