一种原虫样本的染色方法

摘要

本发明提供了一种原虫样本的染色方法，包括一个配制溶液的步骤，所述的溶液包括聚乙烯醇固定液、三色染液和Masson三色染液，包括一个制作刮片标本的步骤，还包括一个染色的步骤。本发明应用相对低毒环保的聚乙烯醇固定液替代传统的肖氏固定液，同时通过复合三色染色法增强虫体的着色来达到传统三色染色的效果，并且可以长期保存标本。本发明应用的聚乙烯醇固定液无毒、环保，对人体无明显危害，而且虫体经复合染色后内部色彩更加丰富，结构更清晰。

主权项

一种原虫样本的染色方法，其特征在于：包括一个配制溶液的步骤，所述的溶液包括聚乙烯醇固定液、三色染液和Masson三色染液，包括一个制作刮片标本的步骤，在所述的制作刮片标本的步骤中，首先在固定液中加入冰醋酸，搅拌混匀，然后将粪样加入固定液，搅拌混匀，吸干固定液，将粪渣刮至载玻片上保存，还包括一个染色的步骤，首先将粪便刮片放入乙醇中清洗，将粪便刮片放在三色染液中染色，吸干染色液后，在添加有冰醋酸的乙醇中清洗，吸干后，将粪便刮片放入Weigert氏铁苏木素染液，水洗，然后采用盐酸酒精分化，再用丽春红酸性品红染液染5‑10分钟，水洗，再用磷钼酸溶液处理，吸干后用苯胺蓝染液复染5‑10分钟，再用冰醋酸处理、酒精脱水、二甲苯透明处理和中性树胶封固； 所述的聚乙烯醇固定液通过如下步骤配制， a)配制硫酸铜水溶液，硫酸铜水溶液的质量百分比浓度在15‑20％之间； b)在上述的硫酸铜水溶液中加入聚乙烯醇，充分溶解，聚乙烯醇的加入量为硫酸铜水溶液的质量的1％‑1.2％，然后在其中加入占硫酸铜水溶液的体积50‑70％的90‑99％质量百分比浓度的乙醇，充分混匀； c)使用前以硫酸铜水溶液计算，按照10∶0.8‑1.2的比例加入冰醋酸； 所述的三色染液通过如下步骤配制：首先配制一个三色基础液，所述的三色基础液由变色酸2R、亮绿、磷钨酸和水组成，所述的变色酸2R占所述的三色染液的重量百分比为0.5‑0.7％，所述的亮绿占所述的三色染液的重量百分比为0.2‑0.4％，所述的磷钨酸占所述的三色染液的重量百分比为0.6‑0.8％，余量为水，然后在三色基础液中加入冰醋酸，所述的冰醋酸的加入量为所述的三色基础液的体积的0.8‑1.2％； 所述的Masson三色染液通过如下步骤配制， 1)配制Weigert氏铁苏木素染液： A液：配制苏木素酒精溶液，使得苏木素在酒精中的质量百分比浓度为0.8％‑1.2％； B液：将重量百分比浓度为25‑35％的三氯化铁水溶液加入水中，三氯化铁水溶液占B液的体积百分比为3‑5％，然后在水中加入质量百分比浓度为25‑40％的浓盐酸，浓盐酸占B液的体积百分比为0.8‑1.2％； 使用前取A液与B液等量混合即可； 2)配制丽春红酸性品红染液： 所述的丽春红酸性品红染液由丽春红、酸性品红、冰醋酸和水组成，在配制丽春红酸性品红染液的步骤中，包括一个配制丽春红酸性品红基础溶液的步骤，在丽春红酸性品红基础溶液中，丽春红占丽春红酸性品红基础溶液的质量百分比为0.5‑0.9％，所述的酸性品红占丽春红酸性品红基础溶液的质量百分比为 0.2‑0.4％，余量为水，然后在丽春红酸性品红基础溶液中加入冰醋酸，所述的冰醋酸的加入量为丽春红酸性品红染液体积的0.8‑1.2％； 3)配制磷钼酸溶液： 所述的磷钼酸溶液由水和磷钼酸组成，其中磷钼酸在水溶液的质量百分比为0.8‑1.2％，余量为水； 4)配制苯胺蓝染液： 所述的苯胺蓝染液由苯胺蓝、冰醋酸和水组成，在配制所述的苯胺蓝染液的过程中，包括一个配制苯胺蓝基础溶液的步骤，在苯胺蓝基础溶液中，苯胺蓝占苯胺蓝基础溶液的质量百分比浓度为1.8‑2.2％，余量为水，然后在苯胺蓝基础溶液中加入冰醋酸，冰醋酸的加入量为苯胺蓝染液的体积的1.8‑2.2％。