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Un procedimiento para analizar directamente el porcentaje de hemoglobina glicada total o el porcentaje dehemoglobina glicada A1c en una muestra de sangre sin medir la hemoglobina total en la muestra de sangre en unprocedimiento aparte, comprendiendo dicho procedimiento: a) poner en contacto fragmentos proteicos que contienen peptidos glicados o aminoacidos glicados con unafructosil aminoacido oxidasa para generar peroxido de hidrogeno (H2O2), donde los fragmentos proteicos segeneran poniendo en contacto la muestra de sangre con 1) un tampon de lisis que libera hemoglobina de losglobulos rojos en la muestra de sangre; 2) un primer agente oxidante que oxida de forma selectiva lassustancias reductoras de bajo peso molecular; 3) un segundo agente oxidante que oxida de forma selectiva lassustancias reductoras de alto peso molecular y 4) una proteasa que digiere la hemoglobina glicada en peptidosglicados o aminoacidos glicados, donde el primer agente oxidante se selecciona del grupo que consiste enperyodinano de Dess-Martin, N-etilmaleimida, yodoacetato sodico, peryodato sodico y cloramina-T, y el segundoagente oxidante se selecciona del grupo que consiste en una sal de tetrazolio, dodecilsulfato sodico, ferricianuropotasico (III) y yodato potasico, b) poner en contacto el H2O2 generado en la etapa a) con una sustanciaformadora de color en presencia de una peroxidasa para generar una senal cuantificable; y c) determinar elporcentaje de hemoglobina glicada total o el porcentaje de hemoglobina glicada A1c en la muestra aplicando lasenal generada en la etapa b) a una curva de calibracion sin medir la hemoglobina total en la muestra de sangrepor separado. |
