发明名称 一种从牛冷冻精子中提取蛋白的方法
摘要 本发明公开了一种从牛冷冻精子中提取蛋白的方法,包括以下步骤:将冷冻精液解冻后转移到离心管中,在4℃、1000×g条件下离心5min,弃上清液;2)加入1ml预冷到4℃的PBS洗涤,在4℃、1000×g条件下离心5min,重复3次;3)向上述沉淀中加200µl蛋白裂解液,涡旋,使样品充分溶解;4)静置5min后,在4℃、12000×g条件下离心30min,上清即为精子蛋白溶液。本发明从牛冷冻精子中提取蛋白的方法操作简单,为将来从分子手段研究精子冷冻保护机理奠定了基础,可以进一步提升精子冷冻后的活力。
申请公布号 CN103113454A 申请公布日期 2013.05.22
申请号 CN201310029025.X 申请日期 2013.01.25
申请人 西北农林科技大学 发明人 胡建宏;王红;李青旺;王鹏;洪洁赟;王艳风;侯放亮;马国际;贾永宏
分类号 C07K1/14(2006.01)I 主分类号 C07K1/14(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种从牛冷冻精子中提取蛋白的方法,其特征在于,包括下列步骤:1)将冷冻精液解冻后转移到离心管中,在4 ℃、1000×g条件下离心5 min,弃上清液;2)加入1 ml预冷到4 ℃的PBS洗涤,在4 ℃、1000×g条件下离心5 min,重复3次; 3)向上述沉淀中加200 µl蛋白裂解液,涡旋混匀,使样品充分溶解;4)静置5 min后,在4 ℃、12000 ×g条件下离心30 min,上清即为精子蛋白溶液。
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