发明名称 |
利用高通量组织芯片检测GOLPH3在脑胶质瘤中的表达的方法 |
摘要 |
本发明涉及一种利用高通量组织芯片检测GOLPH3在脑胶质瘤中的表达的方法,包括:(1)首先构建人胶质瘤细胞的组织芯片,然后进行免疫组化染色;(2)培养人胶质瘤细胞;(3)在GOLPH3的cDNA序列中采用两条候选序列对GOLPH3进行siRNA的敲减;(4)使用Trizol试剂进行总细胞RNA的分离,采用工具箱合成第一股cDNA链,进行实时PCR扩增;(5)检测GOLPH3在脑胶质瘤中的表达并分析数据。本发明的方法使得检测GOLPH3的表达的灵敏性大大提高,能保证在极少的标本中获得足够的信息;检测GOLPH3的表达具有重要的医学价值。 |
申请公布号 |
CN103103263A |
申请公布日期 |
2013.05.15 |
申请号 |
CN201310013304.7 |
申请日期 |
2013.01.14 |
申请人 |
中国人民解放军第二军医大学 |
发明人 |
陈菊祥;周劲旭;徐涛;卢亦成;严勇;秦荣;王洪祥 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
上海泰能知识产权代理事务所 31233 |
代理人 |
黄志达 |
主权项 |
一种利用高通量组织芯片检测GOLPH3在脑胶质瘤中的表达的方法,包括:(1)首先构建人胶质瘤细胞的组织芯片,然后进行免疫组化染色;(2)培养人胶质瘤细胞;(3)在GOLPH3的cDNA序列中采用下列两条候选序列对GOLPH3进行siRNA的敲减:5’‑CAGCGCCTCATCAAGAAA‑3’和5’‑GCCAACACCAATGAGGTT‑3’;(4)使用Trizol试剂进行总细胞RNA的分离,采用工具箱合成第一股cDNA链,进行实时PCR扩增;(5)检测GOLPH3在脑胶质瘤中的表达并分析数据。 |
地址 |
200433 上海市杨浦区翔殷路800号 |