| 发明名称 | 一种D-氨基酸氧化酶的突变体酶蛋白及其制备方法 | ||
| 摘要 | 本发明公开了一种D-氨基酸氧化酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列比对结果，通过定点突变技术将原玻璃蝇节杆菌(Arthrobacterprotophormiae,DSM15035)中D-氨基酸氧化酶的115、119及286三个位点分别突变，构建三点突变表达载体pET-E115A/N119D/T286A，通过原核表达、纯化获得酶蛋白。所获得的突变蛋白对底物D-Met的表观二级速率常数Kcat/Km为1.39×105s-1·M-1，是野生型DAAO的5.03倍，是猪肾来源的pKDAAO蛋白的55.96倍。可以提高对部分D-氨基酸的检测效率，有较好应用价值。 | ||
| 申请公布号 | CN103103167A | 申请公布日期 | 2013.05.15 |
| 申请号 | CN201310032712.7 | 申请日期 | 2013.01.29 |
| 申请人 | 河北师范大学 | 发明人 | 鞠建松;徐书景;赵宝华;李辉欣;冯利伟 |
| 分类号 | C12N9/06(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12Q1/26(2006.01)I;C12R1/06(2006.01)N;C12R1/19(2006.01)N | 主分类号 | C12N9/06(2006.01)I |
| 代理机构 | 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 13100 | 代理人 | 董金国 |
| 主权项 | 一种D‑氨基酸氧化酶的突变体酶蛋白，其特征在于其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，其中：（1）SEQ ID No.1所示的D‑氨基酸氧化酶的氨基酸序列中第115位的谷氨酸（E）突变为丙氨酸（A）；（2）SEQ ID No.1所示的D‑氨基酸氧化酶的氨基酸序列中第119位的天门冬酰胺（N）突变为天门冬氨酸（D）；（3）SEQ ID No.1所示的D‑氨基酸氧化酶的氨基酸序列中第286位的苏氨酸（T）突变为丙氨酸（A）。 | ||
| 地址 | 050024 河北省石家庄市南二环东路20号 | ||