发明名称 利用高通量组织芯片检测BSP在脑胶质瘤中的表达的方法
摘要 本发明涉及一种利用高通量组织芯片检测BSP在脑胶质瘤中的表达的方法,包括:(1)使用Trizol试剂将脑组织进行总RNA的分离;(2)对步骤(1)得到的总RNA进行反转录,得到的cDNA;(3)将上述cDNA与SYBR荧光染料混合并进行扩增;(4)IBSP的表达通过抗GAPDH进行标准化,使用方程进行比较阈值循环法;(5)构建组织芯片,然后进行免疫组化染色,对免疫组化结果进行统计分析,检测BSP在脑胶质瘤中的表达。本发明的方法使得检测BSP的表达的灵敏性大大提高,能保证在极少的标本中获得足够的信息;检测BSP的表达具有重要的医学价值。
申请公布号 CN103088130A 申请公布日期 2013.05.08
申请号 CN201310012888.6 申请日期 2013.01.14
申请人 中国人民解放军第二军医大学 发明人 陈菊祥;徐涛;秦荣;卢亦成;严勇;周劲旭;王洪祥
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;G01N33/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 上海泰能知识产权代理事务所 31233 代理人 黄志达
主权项 一种利用高通量组织芯片检测BSP在脑胶质瘤中的表达的方法,包括:(1)使用Trizol试剂将脑组织进行总RNA的分离;(2)对步骤(1)得到的总RNA进行反转录,得到cDNA;(3)将上述cDNA与SYBR荧光染料混合并进行扩增;(4)IBSP的表达通过抗GAPDH进行标准化,使用以下方程进行比较阈值循环法:表达折叠差异=2‑(Δ目标基因的ct值–Δ参照ct值);(5)构建组织芯片,然后进行免疫组化染色,对免疫组化结果进行统计分析,检测BSP在脑胶质瘤中的表达。
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