一种秸秆低温降解复合菌系的筛选和驯化方法

摘要

本发明公开了一种秸秆低温降解复合菌系的筛选和驯化方法。采集年平均气温在-0.6～8℃的高寒地区的富含纤维素的自然物样品，先进行纤维素降解菌系的富集培养，然后经过限制性继代培养初筛、低温梯度诱导驯化和纤维素酶活复筛，再进行低温多代限制性碳源继代培养驯化，得到秸秆低温降解复合菌系。通过本发明方法筛选和驯化出低温下高效降解玉米秸秆的复合菌系，对促进北方地区秸秆资源的还田利用意义重大。

主权项

一种秸秆低温降解复合菌系的筛选和驯化方法，包括以下步骤：1)采集年平均气温在‑0.6℃～8℃的高寒地区富含纤维素的自然物样品进行纤维素降解菌系的富集培养，获得富集培养物；2)将富集培养物接种到滤纸条培养基中，以28℃为初始培养温度，培养多代后选择滤纸崩溃时间短、溃烂程度高，pH6.5～7.5的培养物，按每转接一次培养温度降低1‑2℃的梯度进行继代培养，至培养温度降低至15℃～20℃的某一温度时，在该温度下连续继代培养，直至每代滤纸条断裂时间一致时停止继代培养，初筛出纤维素降解能力保持好的菌系；3)对初筛菌系进行CMC酶相对活性和纤维素酶活的检测，选出酶活性高的复合菌系；4)将复合菌系在15℃～20℃的某一温度下，以秸秆和滤纸分别为唯一碳源进行交替继代培养，转接培养到多代次以后，选择秸秆分解能力强、培养物pH6.5～7.5的菌系为秸秆低温降解复合菌系。