H6亚型禽流感病毒RT-LAMP试剂盒

摘要

本发明公开了一种H6亚型禽流感病毒RT-LAMP试剂盒，它采用逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)技术，并根据H6亚型AIV血凝素(HA)基因序列的保守区八个位点设计了LAMP的6条特异性引物。应用本发明及其建立的检测方法，解决了现有技术的检测周期长、灵敏度不高、特异性不强、操作复杂、仪器要求高等缺陷，特别适合基层和边境口岸现场检测H6亚型禽流感的需要，对该病的防控具有重要意义。

主权项

一种H6亚型禽流感病毒RT‑LAMP试剂盒，其特征在于该试剂盒含有以下试剂：反应液A含有10×等温反应缓冲液、AMV5U/μL、RNasin20U/μL、Bst DNA PoLymerase8U/μL、10mM dNTP、25mM硫酸镁、5M的甜菜碱、外引物1和外引物2各10μM、内引物1和内引物2各30μM、环引物1和环引物2各40μM；所述10×等温反应缓冲液含有200mMpH值为8.8的三羟基甲基氨基甲烷盐酸盐、100mM氯化钾、100mM硫酸铵、20mM硫酸镁和1%曲拉通X‑100；所述外引物1序列为GGGAATCCCCAATGCGAC，所述外引物2序列为TCTACTCCTGCCCATGTACT，所述内引物1序列为GTAGCAGATCCCATTTTGAGCCTTGGTGATCAAAGCTGGTCAT，所述内引物2序列为CCAGGAATTTTGAATGAAGTAGAAGTTGGGAAACATTTCAAATCT，所述环引物1序列为TAGGTCTTTCCACTATAT，所述环引物2序列为CACTTATTGGATCAGGAGA；反应液B：50×SYBR Green I荧光染料。