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一种小麦胚芽脂肪酶的固定化方法，其特征在于步骤为：（1）用环氧氯丙烷活化载体，活化时添加水溶性助溶剂，使载体带上环氧基；所述载体为硅胶、琼脂糖、壳聚糖、葡聚糖、聚乙二醇中的一种或几种的混合物；载体在使用前需经浓盐酸浸泡后，用大量去离子水洗涤，抽滤干燥后待用；所述水溶性助溶剂选用：二甲亚砜、N,N‑二甲基甲酰胺、二氧六环、乙腈、丙酮、正己烷中的一种或几种的混合物；环氧氯丙烷与载体的摩尔比为1‑20:1；助溶剂加入量占总体系体积的5%‑40%，环氧氯丙烷活化载体的温度为30‑50℃，活化时间为1‑8h； 载体与小麦胚芽脂肪酶的质量比为1‑100:1；（2）用一种带有氨基的化合物将步骤（1）已活化载体上的环氧基打开，使载体带上连接基团，即使环氧基在碱性条件下发生水解，形成氨基；所述带有氨基的化合物选用：氨水、1,2‑二氨基乙烷、3,3’‑二氨基二丙烷、1,6‑己二胺、6‑氨基己酸中的一种；氨基化合物与环氧基摩尔比为1‑100:1，氨基化温度为30‑50℃，控制反应pH为12‑14，控制转速为100‑200rpm；（3）步骤（2）获得的载体通过连接物与小麦胚芽脂肪酶共价连接；所述连接物为碳化二亚胺EDC、碳化二亚胺EDC与N‑羟基琥珀酰亚胺NHS混合物、碳化二亚胺EDC与N‑羟基硫代琥珀酰亚胺（Sulfo‑NHS）混合物中的一种；连接物与小麦胚芽脂肪酶的摩尔比为1‑100:1，交联温度为4‑25℃，交联的pH为5.0‑9.0，交联时间为2‑24h。 |
