JAM1基因修饰间充质干细胞的方法及其应用

摘要

本发明涉及干细胞及基因工程技术领域。本发明提供了一种链接粘附分子JAM1基因修饰间充质干细胞的方法，具体为设计引物，以人表皮细胞总RNA为模板，通过RT-PCR扩增，制备JAM1cDNA，再构建重组人peGFP-N1-JAM1真核表达载体，为提高转染效率，构建慢病毒过表达质粒pGC-FU-JAM1-GFP；将慢病毒感染人胚源性间充质干细胞（hMSC）。本发明还提供了上述方法在制备促进毛发再生的干细胞和细胞移植促进局部皮肤毛发再生中的应用。本发明的JAM1ov-hMSC皮内移植到3周龄裸鼠皮肤组织，在裸鼠皮肤微环境的诱导下，JAM1ov-hMSC迁移到裸鼠毛囊，使裸鼠毛囊生长期延长，毛囊结构改善，毛发再生。

主权项

一种链接粘附分子JAM1基因修饰间充质干细胞的方法，包括以下步骤：A、设计并合成引物如下：上游引物如SEQ ID NO:1所示，下游引物如SEQ ID NO:2所示；以人表皮细胞总RNA为模板，通过RT‑PCR扩增，制备JAM1cDNA序列如SEQ ID NO:3所示；B、构建慢病毒过表达质粒pGC‑FU‑JAM1‑GFP；C、将慢病毒过表达质粒pGC‑FU‑JAM1‑GFP颗粒感染人早胚来源的间充质干细胞，获得JAM1高表达的人早胚来源的间充质干细胞，即JAM1ov‑hMSC。