发明名称 |
一种麦芽糊精底物特异性提高的环糊精糖基转移酶及其制备方法 |
摘要 |
本发明公开了一种麦芽糊精底物特异性提高的环糊精糖基转移酶及其制备方法,属于遗传工程和酶工程领域。本发明通过对P.macerans strain JFB05-01(CCTCC NO:M208063)的CGTase的195位的酪氨酸(Tyr)替换为丝氨酸(Ser),260位的酪氨酸(Tyr)替换为精氨酸(Arg),265位的谷氨酰胺(Gln)替换为赖氨酸(Lys),使AA-2G产量分别提高了23%,44%和40%。对以上突变株组合突变,获得双突变体Y195S/Y260R,Y195S/Q265K和Y260R/Q265K以及三点突变体Y195S/Y260R/Q265K。它们利用麦芽糊精为糖基供体生产AA-2G产量分别提高了57%,49%,55%和59%。这些突变株比野生型CGTase更利于利用麦芽糊精为糖基供体生产AA-2G。 |
申请公布号 |
CN102994468A |
申请公布日期 |
2013.03.27 |
申请号 |
CN201210527869.2 |
申请日期 |
2012.12.10 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
陈坚;堵国成;刘龙;李江华;韩瑞枝 |
分类号 |
C12N9/10(2006.01)I;C12N15/54(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/10(2006.01)I |
代理机构 |
北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 |
代理人 |
何自刚;王玉松 |
主权项 |
一种麦芽糊精底物特异性提高的环糊精糖基转移酶,以GenbankAF047363.1所示的环糊精葡萄糖基转移酶为出发序列,其特征在于第195位的酪氨酸突变成丝氨酸Y195S,第260位的酪氨酸突变成精氨酸Y260R,第265位的谷氨酰胺突变成精氨酸赖氨酸Q265K或其组合。 |
地址 |
214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号 |