改性纳米纤维素多孔复合型高吸渗止血敷料的制备方法

摘要

一种改性纳米纤维的多孔复合型高吸渗止血敷料的制备方法，属于生物医用材料领域。通过碱水高温预处理细菌纤维素，去除内毒素。将所得细菌纤维素在高速细胞粉碎机下打散成细小纤维，再通过适量浓度的碱液碱化处理，活化纤维素，然后加入醚化剂接枝改性细菌纤维素，使其具备一定的止血功效。得到改性的细菌纤维素后使其与海藻酸钠均匀复合，通过离子交联形成凝胶网络，通过冷冻干燥，得到性能良好的止血复合材料。本发明制备的多孔隙复合材料是一种良好的药物载体，可搭载抗菌、止痛及促凝血等药物，在不同PH值下具备良好的药物缓释效果。多孔隙复合材料有优异的生物相容性和细胞亲和性，能够促进干细胞的增殖、分化功能，利于受损组织的快速恢复。

主权项

一种改性纳米纤维素多孔复合型高吸渗止血敷料的制备方法，其特征在于：通过碱水高温预处理细菌纤维素，去除内毒素；将所得细菌纤维素在高速细胞粉碎机下打散成细小纤维，再通过加入适量浓度的碱液碱化处理，活化纤维素，然后加入醚化剂接枝改性细菌纤维素，使其具备一定的止血功效；得到改性的细菌纤维素后与海藻酸钠均匀复合，通过离子交联形成凝胶网络，最后通过冷冻干燥，得到性能良好的止血复合材料；具体步骤如下：步骤一、 细菌纤维素预处理及提纯工艺：取细菌纤维素膜用去离子水多次冲洗，以除去膜表面培养基及杂质；再将膜浸泡于0.01~0.5mol/L的NaOH溶液中，在细胞粉碎机中超声处理2~20min，再在60‑100℃下水浴20～60min，去除留在纳米纤维网络中的菌体和残留培养基，此时膜发生润涨且呈乳白色半透明；然后用去离子水多次冲洗，用酸度计测pH值，pH值7.0~8.0，得到去除内毒素的纯化细菌纤维素膜；步骤二、细菌纤维素的分散及碱化处理：将步骤一中预处理好的细菌纤维素膜浸泡于0.01~0.05mol/L的NaOH溶液中，置于高速分散机下分散成800nm~400μm细小纤维，使该纤维在水溶液中呈半凝胶态，然后再800~1800r/min低速离心过滤；在过滤得到的纤维中加入浓度为20%~50%的异丙醇水溶液，强磁力搅拌下溶剂交换3~6次，每次10~20min，过滤；配制5%~15%（W/V）浓度的NaOH溶液，在室温下，将溶剂交换后得到的纤维在10~30min中内缓缓加入到NaOH溶液中，5~25℃下静置30~120min；步骤三、细菌纤维素的羧甲基化：称取2.5~5.5倍干重于细菌纤维素的氯乙酸钠，溶于浓度为25%~75%的乙醇溶液中，将所得溶液在高速磁力搅拌下，30min内缓缓加入步骤二所得碱化纤维素中得到混合液；将所得混合液在搅拌的情况下置于45~60℃水浴3~5小时，取出冷却后，800~1800r/min低速离心过滤，用50%~80%甲醇多次洗涤，除去残余氯乙酸钠；去离子水多次反复清洗、过滤，10%~30%的乙酸中和，至酸度计测PH为7.5~9.5之间，将产物浸泡于去离子水中；步骤四、羧甲基细菌纤维素/海藻酸钙的离子交联型水凝胶：磁力搅拌、恒温30~50℃下，配制浓度为1~5%的海藻酸钠溶液，待所配制海藻酸钠溶液呈凝胶态，迅速提高转速，缓缓加入由步骤三所得羧甲基化细菌纤维素，在200~500r/min的转速下持续混合30min，待磁子因凝胶粘度的升高而转速逐渐降低，停止磁力搅拌，将凝胶态混合液注入模具六孔培养皿；配制1.5~3.0%CaCl2溶液，将该溶液置于微孔喷壶中，在距模具0.3~0.5m处喷洒，使CaCl2溶液呈雾状覆盖于凝胶表面，待凝胶表面交联，往培养皿中缓缓加入CaCl2溶液没过已交联完成的凝胶表面，静置3~6小时，以使离子交联剂进入凝胶内部；步骤五、多孔复合型敷料成型：取出完成离子交联的复合水凝胶，用去离子水缓缓的冲洗去残留在凝胶基体的盐溶液；将该复合凝胶置于零下40℃冷冻3~5小时至凝胶内的流动水完全凝固，再置于冷冻干燥机冷冻干燥24小时以上，直至凝胶中的水分完全被抽干，形成基于改性纳米纤维的多孔复合型高吸渗止血敷料。