非分离式测定方法

摘要

公开了与特异性结合反应有关的测定方法，其与已知方法相比更简单化。能够产生化学发光的化合物被固定化在固体支持物上，作为用于捕获样品中分析物的特异结合性配对成员。可以激活所述化学发光化合物并且被结合于特异结合性配对成员的活化剂化合物被过量地与样品一起添加至所述固体支持物。在活化剂结合物已经被特异性地结合的位点，引发剂溶液的添加引起化学发光反应。该测定方法被称为非分离式测定法，因为在检测步骤之前，不需要除去或者分离过量的检测标签(活化剂结合物)。该方法适用于多种类型的测定，包括免疫测定、受体-配体测定和核酸杂交测定。

主权项

一种用于检测含有或者疑似含有分析物的样品中的分析物的特异性结合测定法，其特征在于，提供固体支持物，所述固体支持物上固定有化学发光化合物和用于所述分析物的第一特异性结合伴侣，其中，一种活化剂化合物的结合物和所述分析物两者中的至少一个结合到被固定的所述第一特异性结合伴侣，使得所述活化剂化合物可操作地接近被固定的所述化学发光化合物，其中所述活化剂化合物的结合物包含结合于第二特异性结合伴侣的活化剂化合物，以及，添加引发剂溶液使得被固定的所述化学发光化合物和被结合的所述活化剂化合物之间因发生反应而产生化学发光，从而用于检测所述分析物在样品中的存在、位置或含量，其中所述化学发光化合物是所述活化剂化合物的催化底物，所述活化剂化合物是：1)过氧化物酶，其中所述化学发光化合物是过氧化物酶的底物，所述引发剂溶液是包含过氧化物化合物的水溶液，或2)选自于过渡金属盐及复合物、过氧化物酶和含有过渡金属的酶中的至少一种，其中所述过渡金属选自于铁、铜、钴、锌、锰和铬中的至少一种，所述引发剂溶液是包含过氧化物化合物的水溶液，以及当存在所述活化剂化合物和所述引发剂溶液时，所述化学发光化合物被氧化而产生化学发光；所述特异性结合伴侣是抗体、结合蛋白或核酸。