阳离子型咪唑Gemini表面活性剂[Cn-s-Cnim]Br₂在基因转染中的应用

摘要

本发明涉及一种阳离子型咪唑Gemini表面活性剂[Cn-s-Cnim]Br2在基因转染中的应用。本发明中非病毒基因载体为阳离子型咪唑Gemini表面活性剂（[C12-4-C12im]Br2），缓冲液配制的[C12-4-C12im]Br2溶液可直接应用于基因转染。本发明还提供了[C12-4-C12im]Br2有效诱导DNA凝聚形成[C12-4-C12im]Br2/DNA纳米复合物的方法；向受体细胞添加[C12-4-C12im]Br2/DNA的纳米复合物的缓冲液溶液，可以实现基因在细胞内的高效率转染。本发明中[Cn-s-Cnim]Br2及[C12-4-C12im]Br2/DNA纳米复合物对不同的细胞均具有较高的基因转染效率，且对于转染细胞的细胞毒性较低。

主权项

一种阳离子型咪唑Gemini表面活性剂[Cn‑s‑Cnim]Br2在基因转染中的应用，所述阳离子型咪唑Gemini表面活性剂，通式为[Cn‑s‑Cnim]Br2，n=10,12,14；s=2,4,6,作为非病毒基因载体直接应用于基因转染时，先将[Cn‑s‑Cnim]Br2溶解于pH 6.8‑7.5的磷酸盐缓冲液或Tris‑HCl缓冲液中，取100μL加入到培养的细胞中，孵育24小时，利用酶标仪测试细胞样品的吸光度值来测试细胞的存活率，通过细胞存活率判定[Cn‑s‑Cnim]Br2细胞毒性；所述的细胞包括人胚肾细胞（HEK293细胞）、人宫颈癌细胞（HeLa细胞）、人非小细胞肺癌细胞（A549Y‑10细胞）或人口腔表皮样癌细胞（KB细胞）。