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一种咖啡酊中生物碱的测定方法，其特征在于：以水为样品稀释溶剂，采用高效液相色谱法同时对咖啡酊中的咖啡因、胡芦巴碱和尼古丁酸进行检测，其中检测器是二极管阵列检测器,具体测定步骤如下：（1）标准工作曲线制定：在4.25×10‑4‑0.17mg/mL范围内用甲醇配制胡芦巴碱标准品的至少五个浓度的标准溶液，在3.33×10‑4‑0.26mg/mL范围内用甲醇配制尼古丁酸标准品的至少五个浓度的标准溶液，在2.75×10‑4‑0.22mg/mL范围内用甲醇配制咖啡因标准品的至少五个浓度的标准溶液，再利用高效液相色谱仪分别对上述所有浓度的标准溶液中的三种标准品的含量进行检测，并根据三种标准品的峰面积和相应的浓度分别绘制三种标准品的标准工作曲线并计算得到其回归方程；（2）样品制备：称取0.100g咖啡酊剂于10mL容量瓶中用水稀释定容，超声5min，经0.45μm水相滤膜过滤后使用，再利用高效液相色谱仪采用与步骤（1）相同的条件分别对样品溶液进行检测，并根据得到的峰面积分别带入标准工作曲线的回归方程中，计算出样品中的咖啡因、胡芦巴碱和尼古丁酸含量；高效液相色谱分析条件如下：色谱柱： waters C18分析柱，250 mm × 4.6 mm, 5 μm；流动相：流动相A为0.1%甲酸水，流动相B为甲醇；梯度洗脱条件：2%B开始，5min后10%B,12min后50%B,15min后100%B,保持5min,21min以2%B平衡柱子4min，分析时间共25min；流速1mL/min；柱温30℃；检测波长：265nm。 |
