同时快速检测五种染色体数目的方法及试剂盒与应用

摘要

本发明公开了一种同时快速检测五种染色体数目的方法以及应用此方法的试剂盒与该试剂盒的应用。该方法通过同时对以下STR位点进行扩增：D21S1270、D21S1411、D21S1412、D21S1414、D21S1280、D18S535、D18S51、D18S1002、D18S391、D18S386、D13S136、D13S294、D13S305、D13S240、D13S256、DXS337、X22、DXS8377、DXS981、DXYS218、DYS448、SRY和AMEL，将得到的荧光标记的PCR产物变性后，通过毛细管电泳检测，PCR产物的量通过相应位置的荧光峰值面积高低间接反应出来，从而确定21号、18号、13号以及性染色体的数目。实现该方法的试剂盒包括前述位点的引物。该试剂盒能同时对13、18、21和性染色体等五种染色体的数目进行检测，所需样本量少，绒毛、羊水和脐血样品都可以进行诊断。使用该试剂盒，检测成本低，更适用于大规模检测。

主权项

一种实现同时快速检测五种染色体数目的方法的试剂盒，其特征在于：包含如下荧光标记的引物混合物：引物混合物中具体的引物序列如下所示：D13S136位点的上游引物为5’‑GGT GCT TCA TGC ATT GCT AA‑3’；下游引物为5’‑TTT AGTGCT TTA TGA TTA CAG TAG AGTGTG‑3’；D13S240位点的上游引物为5’‑CAA CGT TTA TTG ACT TAA AGG G‑3’；下游引物为5’‑CGT GTA GTC CCA GCT ACT C‑3’；D13S256位点的上游引物为5’‑CCT GCG CAA CAA GAG CAA A‑3’；下游引物为5’‑AGG AGA GAG ACA TAA TTG TG‑3’；D13S294位点的上游引物为5’‑CCG AGT GAG CAG CCT CTA AA‑3’；下游引物为5’‑ATC AGA AAT CAG GCC AGT GTG‑3’；D13S305位点的上游引物为5’‑GCGTGTTTGAGGACCTGTCGTTA‑3’；下游引物为5’‑TGCTAATAGAGCAGTTAAGGCAC‑3’；D18S51位点的上游引物为5’‑CGAACCCGACTACCAGCAAC‑3’；下游引物为5’‑GACGCATGTTCATGCCACTG‑3’；D18S535位点的上游引物为5’‑TCTAGTGACAAAAGCCACAC‑3’；下游引物为5’‑AGTCAGAAATATAGATGAGAATGCA‑3’；D18S386位点的上游引物为5’‑TCACCA GAA TCA CTT GGA AC‑3’；下游引物为5’‑TCG ATG AAG TAG CTA AGC AG‑3’；D18S1002位点的上游引物为5’‑CAG AGAGTGAATGCTGTACAAACA GC‑3’；下游引物为5’‑CATCATGTGAGTGTGCTTTTCAGGAG‑3’；D18S391位点的上游引物为5’‑GGAGTTACCACAGGCAATGTGACT‑3’；下游引物为5’‑TAGTCTTCACTATTCCCATCTGAG‑3’；D21S1411位点的上游引物为5’‑ATCATGAATGCATAGATGGATG‑3’；下游引物为5’‑ATT GTG TGT CCT TCC AGG C‑3’；D21S1412位点的上游引物为5’‑CGCTGGTTGCAGTGAGTTG‑3’；下游引物为5’‑GGGAAGGCTATGGAGGAGA‑3’；D21S1414位点的上游引物为5’‑GCCACCCAGTAAAAAATTACT‑3’；下游引物为5’‑CACTCTGTCTGTCTGTCTATC‑3’；D21S1280位点的上游引物为5’‑AGAGGGCATCAAAATTTGGA‑3’；下游引物为5’‑GATGAAATAGGAGCCATAAAGC‑3’；D21S1270位点的上游引物为5’‑CTAAGCCACTGTATTATTCAGGGC‑3’；下游引物为5’‑TGTGTCTCCAGGTTGCAGGTGACA‑3’；DXS337位点的上游引物为5’‑TGGATCATTCAGCTTTCAGG‑3’；下游引物为5’‑GTGAGAGAGTGAGACCCTGTC‑3’；X22位点的上游引物为5’‑TATTGAGAGTTGGAAAGAAA‑3’；下游引物为5’‑CGCATTGTTGCTACTTGAGA‑3’；DXS981位点的上游引物为5’‑CTCGATGTGGCCTTCCTTAAATG‑3’；下游引物为5’‑TACTCTCCACTTTTCAGAGTCA‑3’；DYS448位点的上游引物为5’‑CAT GGA TCC AAA TAA AGA ACA GAG A‑3’；下游引物为5’‑GCA TAT TTC TTG ATT CCC TGT G‑3’；AMEL位点的上游引物为5’‑CCCTGGGCTCTGTAAAGAATAGT‑3’；下游引物为5’‑ATCAGAGCTTAAACTGGGAAGCTG‑3’；SRY位点的上游引物为5’‑AGTAAAGGCAACGTCCAGGAT‑3’；下游引物为5’‑TTCCGACGAGGTCGATACTTA‑3’；DXS8377位点的上游引物为5’‑CAGATC ATG GCT TAC CAC AG‑3’；下游引物为5’‑GAG CTT TGG AAA GCT AGT GT‑3’；DXY218位点的上游引物为5’‑TGTCTATGGGTTTCCTCTGT‑3’；下游引物为5’‑CGTAACTCCGTCTCAAAATA‑3’。