发明名称 一种基于活细胞矩阵技术的物质毒性的确定方法
摘要 一种基于活细胞矩阵技术的物质毒性的确定方法,属于物质毒性的确定方法。其步骤为:首先,测试环境毒物对大肠杆菌的生长抑制作用,求算环境毒物对细菌生长抑制的EC20;取出冻存有大肠杆菌的培养管或微孔板,融化,迅速转移复制入一块装有新鲜培养基的培养管或微孔板,培养细菌3个小时,将其分装入多孔微孔板;选择一个或多个测试浓度,在培养管或微孔板内快速加入受试环境毒物;将加过受试化合物的培养管或微孔板放入酶标仪,记录报告基因信号在此后随时间变化的情况。本发明可以提供高品质的基因表达数据;同时更快捷、简便,无需复杂的前处理过程;并且,具有很高的可重复性;成本低,可以最大程度的避免人为操作误差或干扰。
申请公布号 CN102925532A 申请公布日期 2013.02.13
申请号 CN201210372540.3 申请日期 2012.09.29
申请人 南京大学 发明人 张效伟;苏冠勇;夏洁;于红霞
分类号 C12Q1/02(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 主分类号 C12Q1/02(2006.01)I
代理机构 南京知识律师事务所 32207 代理人 蒋海军
主权项 一种基于活细胞矩阵技术的物质毒性的确定方法,包括以下步骤:(1)首先,测试环境毒物对大肠杆菌的生长抑制作用,在培养管或微孔板内接种相同密度的大肠杆菌,当细菌进入对数生长期时,根据细菌对环境毒物的耐受性,加入稀释浓度的化合物、混合物、环境样品的提取物或馏分并绘制S型曲线,求算环境毒物对细菌生长抑制的EC20;(2)取出冻存于‑80摄氏度的存有大肠杆菌的培养管或微孔板,在室温下放置至其融化,迅速用复制触角将其转移复制入一块装有新鲜培养基的培养管或微孔板,培养细菌3个小时,此时,细菌进入对数生长期,将其分装入多孔微孔板;(3)选择一个或多个测试浓度,在培养管或微孔板内快速加入受试环境毒物;(4)将加过受试化合物的培养管或微孔板放入酶标仪,记录报告基因信号在此后随时间变化的情况。
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