一种治疗猪呼吸道综合症的卵黄抗体注射液的制备方法

摘要

本发明涉及一种治疗猪呼吸综合症的卵黄抗体注射液的制备方法，包括以下步骤：1)分离当前流行的PRRSV、PCV-2和猪肺炎支原体，分别用MARC-145细胞培养PRRSV，用PK15细胞培养PCV-2和支原体培养基培养猪肺炎支原体，测定病毒和支原体滴度后制备成三联灭活疫苗；2)利用制备的PRRSV/PCV2/猪肺炎支原体三联灭活疫苗免疫非免疫产蛋母鸡；3)在无菌条件下收集卵黄；4)运用微量中和实验测定PRRSV、PCV-2的中和抗体效价，运用ELISA测定猪肺炎支原体抗体效价；5)将效价测定好的卵黄抗体进行无菌检验，合格后无菌分装。本发明的有益效果：卵黄抗体注射液能有针对性的对PRRSV、PCV2和猪肺炎支原体单独感染或混合感染病猪进行有效的治疗。

主权项

一种治疗猪呼吸综合症的卵黄抗体注射液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)分离当前流行的PRRSV、PCV‑2和猪肺炎支原体，分别用MARC‑145细胞培养PRRSV，用PK15细胞培养PCV‑2和支原体培养基培养猪肺炎支原体，测定病毒和支原体滴度后制备成三联灭活疫苗；2)利用制备的PRRSV/PCV2/猪肺炎支原体三联灭活疫苗免疫非免疫产蛋母鸡；3)在无菌条件下收集卵黄，运用等量的PH7.2的0.1M PBS后置组织匀浆器中，5000转/分匀浆1分钟，加入乳酸至PH为4.0，2～8℃搅拌过夜，置‑80℃冷冻后解冻，并重复冷冻一次，然后8000转/分离心10分钟，收集上清，按照1∶1的比例加入饱和硫酸铵，2～8℃搅拌2消失，后2～8℃静置过夜，8000转/分离心10分钟收集沉淀，加入0.1M PBS溶解后除去硫酸铵；4)运用微量中和实验测定PRRSV、PCV‑2的中和抗体效价，运用ELISA测定猪肺炎支原体抗体效价；5)将效价测定好的卵黄抗体进行无菌检验，合格后无菌分装，使PRRSV、PCV‑2和猪肺炎支原体抗体效价不低于1∶64。