一种龙山百合高效脱毒工艺

摘要

本发明公开了一种龙山百合高效脱毒工艺，其特征在于：步骤如下：1)预处理；2)第一次脱毒；3)第二次脱毒；4)生根培养。本发明通过多代脱毒结合热处理保证了100％的脱毒效率，而且突破了传统脱毒工艺中组培苗成活率不高。应用抗氧化剂AC有效抑制茎尖培养的褐化现象。在启动培养基中添加一定量的活性炭有效地吸附茎尖呼吸过程中产生的酚类、醛类等有毒物质，减少褐化，提高成活率。在从生芽诱导培养基中用1/2MS和较高浓度的6-BA，是为了更好地促进小鳞茎的发生，抑制叶片的生长；提高活性炭的浓度，一方面是为了减少褐化，提高成活率，另一方面也是为了造成一个黑暗的环境，从而促进小鳞茎的产生。

主权项

一种龙山百合高效脱毒工艺，其特征在于：步骤如下：1)、预处理：将采集回来的龙山百合珠芽冲洗，洗净泥沙等杂质，再经过35℃恒温热处理后进行消毒；2)、第一次脱毒：将恒温热处理后的珠芽取出，冲洗表面的杂质，剥取0.4‑0.5mm大小的不带叶原基或带1个叶原基的茎尖，接种在启动培养基中；当诱导的小鳞茎达到一定基数的时候再进行下一步骤；3)、第二次脱毒：先将刚转接有小鳞茎的培养基置于35℃恒温下培养，以达到钝化病毒的目的；再用解剖针剥取0.2‑0.3mm大小不带叶原基的茎尖，接种在启动培养基中；在光培养温度25℃，光照强度2500Lx，待产生小鳞茎时即可转入丛生芽诱导培养基中；4)、生根培养：小鳞茎达到一定的基数时即可转入生根培养基中，培养约35‑40d，当小鳞茎产生3‑5条1cm左右的根系时就可以进行移栽。