鱼类卵巢生殖细胞染色体的制备方法

摘要

本发明公开一种鱼类卵巢生殖细胞染色体的制备方法，是取活体成熟卵巢并用生理盐水清洗；将卵巢置于含有1μg/ml雌激素的生理盐水中且将卵巢切成小段，置于摇床上室温避光培养1～3h；在培养皿底部涂一层1％琼脂并盛入4％冰醋酸溶液，从所培养的卵巢中取出几粒卵放入4％冰醋酸溶液中，待卵核移动到动物极后将卵核剥离出来，再将卵核周围的卵黄剥掉，将卵核放入装有预冷的卡诺固定液中冷冻过夜，所述卡诺固定液是由甲醇和冰醋酸混合而成，甲醇与冰醋酸的体积比为3∶1；再取出冷冻过夜的3～5粒卵核于载玻片上放置10～20秒；然后再将载有卵核的载玻片放入装有染色剂的染缸中避光染色30～45min，纯水避光浸泡载玻片30min后，将盖玻片盖在载玻片上。

主权项

一种鱼类卵巢生殖细胞染色体的制备方法，其特征在于依次按如下步骤进行：a.取活体成熟卵巢并用生理盐水清洗；b.将卵巢置于含有1μg/ml雌激素的生理盐水中且将卵巢切成小段，置于摇床上室温避光培养1～3h；c.在培养皿底部涂一层1％琼脂并盛入4％冰醋酸溶液，从所培养的卵巢中取出几粒卵放入4％冰醋酸溶液中，待卵核移动到动物极后将卵核剥离出来，将卵核放入装有预冷的卡诺固定液中冷冻过夜，所述卡诺固定液是由甲醇和冰醋酸混合而成，甲醇与冰醋酸的体积比为3∶1；d.再取出冷冻过夜的3～5粒卵核于载玻片上放置10～20秒；然后再将载有卵核的载玻片放入装有染色剂的染缸中避光染色30～45min，纯水避光浸泡载玻片30min后，将盖玻片盖在载玻片上。