SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测miR-126的方法

摘要

本发明是关于一种利用SYBR Green I荧光定量PCR检测miR-126的方法，该检测方法是提取细胞或组织总RNA或小分子RNA，经过自主设计的逆转录引物进行逆转录反应，再根据miR-126的相关核苷酸序列设计出了荧光定量PCR检测引物，来检测miR-126这种MicroRNA在不同标本中的表达差异。本检测方法由逆转录反应系统、PCR扩增反应系统和对应的逆转录引物、检测引物组成。本发明的检测方法具有实验操作简便、检测成本低、特异性好、灵敏度和自动化程度高，可以为MicroRNA的功能性研究提供可靠的实验基础。

主权项

一种SYBR Green I荧光定量PCR检测miR‑126的引物，其特征在于其包括：逆转录引物和检测引物，所述逆转录引物的核苷酸序列组成如下：5′GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCGCAT3′；所述检测引物由上下游两条引物组成，上游引物由19个核苷酸组成，核苷酸序列是5′AGTGCAGGGTCCGAGGTAT3′；下游引物由25个核苷酸组成，核苷酸序列是5′GCCGCTCGTACCGTGAGTAATAATG3′。