发明名称 一种水稻光敏核不育系的分子检测方法及试剂盒
摘要 本发明公开了一种鉴别水稻光敏核不育基因pms12-1的分子标记方法和试剂盒,包括基因组DNA的提取、PCR扩增、扩增产物的酶切分析。根据pms12-1的序列设计了2对引物和2种核酸内切酶,以此引物通过PCR反应,再对扩增产物进行酶切分析,确定光敏基因的SNP类型,从而鉴定是否含有光敏核不育基因或者可育基因,并能进一步区别pms12-1基因的纯合体和杂合体,达到快速简便鉴定水稻光敏核不育系的目的,从而指导田间选育,加速育种进程。
申请公布号 CN102864227A 申请公布日期 2013.01.09
申请号 CN201210355874.X 申请日期 2012.09.24
申请人 湖南杂交水稻研究中心;湖南隆平高科基因科技有限公司 发明人 曹孟良;李丁;赵迎曦;夏玉梅;袁隆平;高婧;沈春修;方真
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 长沙市融智专利事务所 43114 代理人 袁靖
主权项 一种水稻光敏核不育系的分子检测方法,其特征在于,包括如下步骤:a.抽提水稻叶片中基因组总DNA;b.任选以下一对引物对提取的基因组总DNA进行PCR扩增;GC‑D1:正向引物:GCATGCTTCACCAGCACGTCCA,反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG;GC‑D2:正向引物:CCCATATATCTTGTCCAGTGCT,反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG;c.将扩增产物用核酸内切酶进行酶切;如用引物GC‑D1扩增得到的PCR产物用核酸内切酶RsaI进行酶切;如用引物GC‑D2扩增得到的PCR产物用核酸内切酶AccI进行酶切;d.由酶切产物的带谱推出该基因的SNP如果是G,则该材料为光敏核不育系;SNP如果是C,则不是光敏核不育系。
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