发明名称 |
一种水稻光敏核不育系的分子检测方法及试剂盒 |
摘要 |
本发明公开了一种鉴别水稻光敏核不育基因pms12-1的分子标记方法和试剂盒,包括基因组DNA的提取、PCR扩增、扩增产物的酶切分析。根据pms12-1的序列设计了2对引物和2种核酸内切酶,以此引物通过PCR反应,再对扩增产物进行酶切分析,确定光敏基因的SNP类型,从而鉴定是否含有光敏核不育基因或者可育基因,并能进一步区别pms12-1基因的纯合体和杂合体,达到快速简便鉴定水稻光敏核不育系的目的,从而指导田间选育,加速育种进程。 |
申请公布号 |
CN102864227A |
申请公布日期 |
2013.01.09 |
申请号 |
CN201210355874.X |
申请日期 |
2012.09.24 |
申请人 |
湖南杂交水稻研究中心;湖南隆平高科基因科技有限公司 |
发明人 |
曹孟良;李丁;赵迎曦;夏玉梅;袁隆平;高婧;沈春修;方真 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
长沙市融智专利事务所 43114 |
代理人 |
袁靖 |
主权项 |
一种水稻光敏核不育系的分子检测方法,其特征在于,包括如下步骤:a.抽提水稻叶片中基因组总DNA;b.任选以下一对引物对提取的基因组总DNA进行PCR扩增;GC‑D1:正向引物:GCATGCTTCACCAGCACGTCCA,反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG;GC‑D2:正向引物:CCCATATATCTTGTCCAGTGCT,反向引物:TAGCTTGCTTCATCTTGGTATG;c.将扩增产物用核酸内切酶进行酶切;如用引物GC‑D1扩增得到的PCR产物用核酸内切酶RsaI进行酶切;如用引物GC‑D2扩增得到的PCR产物用核酸内切酶AccI进行酶切;d.由酶切产物的带谱推出该基因的SNP如果是G,则该材料为光敏核不育系;SNP如果是C,则不是光敏核不育系。 |
地址 |
410125 湖南省长沙市芙蓉区马坡岭远大二路736号 |