铁皮石斛的组培繁殖方法

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及一种铁皮石斛无菌苗无激素培养及快速繁殖的方法。内容包括，铁皮石斛无菌种子萌发，原球茎的形成及分化，以及壮苗与生根的培养技术。选取成熟的蒴果，无菌播种到原球茎培养基，1.5个月后将长出的原球茎放入分化培养基中进行苗分化，1.5个月后将形成的1cm小苗放入壮苗及生根培养基中，2个月后可观察到生长一致、株高约6-8cm的瓶苗，每颗瓶苗至少5条发达的根系。与传统繁殖方式相比，本方法采用无激素培养，极大提高了种苗繁殖速度，苗生长健壮，假鳞茎明显，发根多，移栽成活率高，生产成本低，不存在诱变、污染等食品安全问题，且繁殖速度快，生根苗健壮，移栽成活率高，达到了产业化生产水平。

主权项

铁皮石斛的无激素组培繁殖方法，包括蒴果消毒、原球茎诱导，分化并壮苗生根培养，试管苗移栽步骤，其特征在于取铁皮石斛的蒴果切开取出的种子进行原球茎诱导、分化、壮苗、生根培养，培养的温度为20‑23℃，湿度为30‑45%，光照条件为自然光2000‑2500 LUX +人工辅助光1500‑2000 LUX，光照时间为12h/d；原球茎诱导培养基为改良MS +10%香蕉+10%马铃薯+蛋白胨1%，分化培养基为B5+10%香蕉 +10%马铃薯，壮苗生根培养基为1/2改良MS +20%香蕉+活性炭0.5%；其中改良MS用KNO3减半，NH4NO3减半。