一种筛选治疗神经退行性疾病药物的方法

摘要

一种筛选治疗神经退行性疾病药物的方法，提供一种利用原子力显微镜(AFM)与电化学联用筛选治疗神经退行性疾病药物的新途径，利用原子力显微镜和电化学方法联用，通过对其形貌图变化和电化学工作曲线信号变化来筛选治疗神经退行性疾病的潜在药物。本发明操作简便，试剂及样品消耗量极少，筛选周期短，可以模拟近生理环境下操作，两种方法相互验证结果真实可靠。适用于强结合及弱结合体系，可用于对天然产物（如中药）、合成药物及生物工程制药的药物筛选。

主权项

一种筛选治疗神经退行性疾病药物的方法，其特征在于，利用到原子力显微镜与电化学，通过分析AFM形貌图和电化学工作曲线图来对潜在药物进行筛选和评估；其具体步骤如下：①．将Aβ42用PBS配成浓度为25uM的溶液放置37℃的恒温水浴中孵化2天，制样；将0.25 mgAβ42溶解于220μL浓度为5mM的NaOH溶液中，在超声环境中静置1 min，室温放置10min，移至离心管中，在0℃的环境中，进行13000 rpm的高速离心30 min，移取上清液分装至离心管中，放置冰箱零下20℃下储藏备用，储备溶液浓度为250μM；使用时加入与NaOH等量等浓度的HCl将其中和成为中性溶液，再用浓度为10mM、PH=7.4的PBS稀释为浓度为25μM的Aβ溶液，放置恒温水浴中孵化2天，用原子力显微镜对其进行表征；②．在①的基础上加载药物，用原子力显微镜对其进行液相原位表征；③．在做①的同时，另作一份①中的平行溶液以浓度为25μM的Fc‑KLVFFKKKKKK为信标，放入37℃的恒温水浴中孵化，并隔段时间利用电化学方法观察研究Aβ的自聚集；④．在③的基础上，加载药物，利用电化学方法研究药物与Aβ自聚体的相互作用，此时，将环境调节为接近人体生理环境，并在整个过程中进行保持。