一种筛选非人哺乳动物XY精子差异表达基因的方法

摘要

本发明公开了一种筛选哺乳动物XY精子差异表达基因的方法，包括下列步骤：流式细胞仪分选X、Y精子；分离纯化X、Y精子mRNA；通过Y精子对X精子扣除杂交获得Y精子对X精子差异表达的mRNA；通过X精子对Y精子扣除杂交获得X精子对Y精子差异表达的mRNA；将得到的差异表达的mRNA采用Super SMART技术扩增，构建Y-X扣除杂交cDNA质粒库，克隆，测序，生物信息学分析。采用该方法得到的mRNA纯度高、完整且浓度高体积小，又是层析柱式的逐级淋洗使cDNA与mRNA吸附得更充分，而且层析柱上的对照cDNA可以反复多次用于扣除杂交反应，同时，操作简单、灵敏、试验时间短、无污染。

主权项

一种筛选非人哺乳动物XY精子差异表达基因的方法，其特征在于，具体包括下列步骤：1)流式细胞仪分选X、Y精子；2)分离纯化X、Y精子mRNA；3)通过Y精子对X精子扣除杂交获得Y精子对X精子差异表达的mRNA；4)通过X精子对Y精子扣除杂交获得X精子对Y精子差异表达的mRNA；5)将得到的差异表达的mRNA采用Super SMART技术扩增，构建Y‑X扣除杂交cDNA质粒库，克隆，测序，生物信息学分析。