用于同时检测解脲支原体、人型支原体和生殖器支原体的组合物和试剂盒

摘要

本发明公开了用于同时检测解脲支原体、人型支原体和生殖器支原体的组合物和试剂盒，它们均包括有关SEQ ID No：1-6所示序列或其至少15个核苷酸连续的片段、或与它们存在具有至多5个核苷酸差异的序列的特异性引物；以及SEQ ID No：7-9所示的序列或其互补序列或它们的至少15个核苷酸连续的片段、或与它们存在具有至多5个核苷酸差异的序列的特异性探针。本发明的用于同时检测解脲支原体、人型支原体和生殖器支原体的组合物和试剂盒可以在一个反应体系内同时检测三种不同的支原体，不仅提高了泌尿生殖系统感染性疾病的早期检出率，而且减少了操作人员的操作时间，降低了检测成本，还减轻了病人经济负担。

主权项

用于同时检测解脲支原体、人型支原体和生殖器支原体的组合物，其特征在于，所述组合物由以下序列组成：1)用于PCR扩增解脲支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为如SEQ ID No：1所示的序列；2)用于PCR扩增解脲支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为如SEQ ID No：2所示的序列；3)用于PCR扩增人型支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为如SEQ ID No：3所示的序列；4)用于PCR扩增人型支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为如SEQ ID No：4所示的序列；5)用于PCR扩增生殖器支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为如SEQ ID No：5所示的序列；6)用于PCR扩增生殖器支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为如SEQ ID No：6所示的序列；7)与1)和2)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为如SEQ ID No：7所示的序列或其互补序列；8)与3)和4)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为如SEQ ID No：8所示的序列或其互补序列；9)与5)和6)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为如SEQ ID No：9所示的序列或其互补序列；其中，7)‑9)所述的探针在5’端带有互不相同的荧光报告基团，并且在3’端带有淬灭基团；或者所述组合物由以下序列组成：1)用于PCR扩增解脲支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为TGGTGAGGTAATGGC；2)用于PCR扩增解脲支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为GTTCACGCGGCATTG；3)用于PCR扩增人型支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为TCCGCCTGAGTAGTA；4)用于PCR扩增人型支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为GGATGTCAAGAGTGG；5)用于PCR扩增生殖器支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为ACCAGTGGCGAAGGC；6)用于PCR扩增生殖器支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为ACGGTGTGGACTACT；7)与1)和2)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为AGTCAATGACGCGTA，其中所述的探针在5’端带有6‑羧基荧光素，并且在3’端带有黑洞淬灭剂1；8)与3)和4)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为GTAGTATGCTCGCAA，其中所述的探针在5’端带有六氯‑6‑甲基荧光素，并且在3’端带有黑洞淬灭剂1；9)与5)和6)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为TGACGCTTAGGCTTG，其中所述的探针在5’端带有羧基‑X‑罗丹明，并且在3’端带有黑洞淬灭剂1；或者所述组合物由以下序列组成：1)用于PCR扩增解脲支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为ATCGAATCAGATAGTTGGTGAGGTAATGGC；2)用于PCR扩增解脲支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为ATCGATCGATCGATCGTTCACGCGGCATTG；3)用于PCR扩增人型支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为ATCGACATTAAATGATCCGCCTGAGTAGTA；4)用于PCR扩增人型支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为ATCGATCTTGCGAAGGATGTCAAGAGTGG；5)用于PCR扩增生殖器支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为ATCGATCGATCGAACACCAGTGGCGAAGGC；6)用于PCR扩增生殖器支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为 ATCGATCTATCGTTTACGGTGTGGACTACT；7)与1)和2)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为ATCGATGGCTCACCAAGTCAATGACGCGTA，其中所述的探针在5’端带有6‑羧基荧光素，并且在3’端带有黑洞淬灭剂1；8)与3)和4)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为ATCGAATCCGCCTGAGTAGTATGCTCGCAA，其中所述的探针在5’端带有六氯‑6‑甲基荧光素，并且在3’端带有黑洞淬灭剂1；9)与5)和6)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为ATCGAAGGCCATTACTGACGCTTAGGCTTG，其中所述的探针在5’端带有羧基‑X‑罗丹明，并且在3’端带有黑洞淬灭剂1；或者所述组合物由以下序列组成：1)用于PCR扩增解脲支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为AGTTGGTGAGGTAATGGC；2)用于PCR扩增解脲支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为ATCGTTCACGCGGCATTG；3)用于PCR扩增人型支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为TGATCCGCCTGAGTAGTA；4)用于PCR扩增人型支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为GAAGGATGTCAAGAGTGG；5)用于PCR扩增生殖器支原体靶核酸序列的第一引物，该引物的序列为AACACCAGTGGCGAAGGC；6)用于PCR扩增生殖器支原体靶核酸序列的第二引物，该引物的序列为TTTACGGTGTGGACTACT；7)与1)和2)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为CCAAGTCAATGACGCGTA，其中所述的探针在5’端带有6‑羧基荧光素，并且在3’端带有黑洞淬灭剂1；8)与3)和4)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为TGAGTAGTATGCTCGCAA，其中所述的探针在5’端带有六氯‑6‑甲基荧光素，并且在3’端带有黑洞淬灭剂1；9)与5)和6)所述引物的PCR扩增产物杂交的寡核苷酸探针，该探针的序列为TACTGACGCTTAGGCTTG，其中所述的探针在5’端带有羧基‑X‑罗丹明，并且在3’端带有黑洞淬灭剂1。