发明名称 鲍肌肉萎缩症病毒的快速诊断试剂盒及检测方法
摘要 本发明公开一种鲍肌肉萎缩症病毒的快速诊断试剂盒,其包括以下部件:(1)DNA提取液;(2)消化液;(3)G1液:用于PCR一扩反应,包括含Mg2+的Buffer、dNTP、正向引物F1、反向引物R1和Taq酶;F1为:5-ATGACAGATTTCACCGTAAGCAATGAAAATC-3,R1为:5-CTAGCTGGCTTTGGTATAAGTAGTACCAAAAG-3;(4)阳性对照H液:100ng/μL肌肉萎缩症病毒感染的鲍基因组DNA。本发明还公开了应用该快速诊断试剂盒进行鲍肌肉萎缩症病毒的检测方法。本发明提供的快速诊断试剂盒和检测方法可用于鲍养殖过程中各时期的病毒跟踪检测,也可用于环境监测,避免病毒传播流行,提高科学管理效率,具有很高的实用价值。
申请公布号 CN102181574B 申请公布日期 2012.12.05
申请号 CN201110065749.0 申请日期 2011.03.18
申请人 中国水产科学研究院南海水产研究所 发明人 姜敬哲;王江勇;郭志勋;庄军;刘广锋
分类号 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N 主分类号 C12Q1/70(2006.01)I
代理机构 广州知友专利商标代理有限公司 44104 代理人 宣国华
主权项 鲍肌肉萎缩症病毒的快速诊断试剂盒,其特征在于,其包括以下部件:(1) DNA提取液:① A液: 10mmol/L pH为8.0的Tris‑Cl,1mmol/L EDTA和0.1% (m/V) SDS的混合溶液;② B液:12mL的5mol/L醋酸钾,2.3mL冰醋酸和5.7mL水的混合溶液;③ C液:异丙醇;④ D液:70%乙醇;⑤ E液:10mmol/L pH为8.0的Tris‑Cl和1mmol/L EDTA的混合溶液;(2) 消化液:F1液: 20mg/mL蛋白酶K;F2液: 4mg/mL RNase A;(3) G1液:含3mmol/L Mg2+、100mmol/L KCl、400μmol/L dNTPs、2μmol/L正向引物F1、2μmol/L反向引物R1、4U的Taq酶;F1为:5‑ ATGACAGATTTCACCGTAAGCAATGAAAATC‑3,R1为:5‑ CTAGCTGGCTTTGGTATAAGTAGTACCAAAAG‑3;(4) 阳性对照H液:100ng/μL肌肉萎缩症病毒感染的鲍基因组DNA;(5) G2液:含3mmol/L Mg2+、100mmol/L KCl、400μmol/L dNTPs、2μmol/L正向引物F2、2μmol/L反向引物R2、4U的Taq酶;F2为:5‑GCAACATTCCAGTTAGCC‑3,R2为:5‑CCGTAGTAGCAGGAGCAA‑3。
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