发明名称 一种生产酵母核糖核酸的方法
摘要 本发明提供一种生产酵母核糖核酸的方法,该方法中核糖核酸提取过程不外加氯化钠、氯化铵等盐类用于改变细胞的渗透压,也不加高浓度的氢氧化钠等碱类物质来抽提核糖核酸,提纯环节利用两次调整pH来去除大部分酸性蛋白和碱性蛋白,利用活性白土吸附剂来吸附杂蛋白及多糖物质,二次利用等电点沉淀核糖核酸,因此经抽提核糖核酸后的脱核酵母粉含盐量极低,适合于作为饲料,生产过程中产生的酸碱废水也显著降低。生产制备的核糖核酸纯度高,颜色极浅,呈乳白色,核糖核酸磷末端结构完好,适合于核酸下游工业5'-核苷酸的制备,也可制备溶解性能优异,低温即可溶解,溶解后可得透明的高纯度核糖核酸钠盐。
申请公布号 CN102796732A 申请公布日期 2012.11.28
申请号 CN201210299574.4 申请日期 2012.08.22
申请人 楚大波 发明人 楚大波
分类号 C12N15/10(2006.01)I;C07H21/02(2006.01)I;C07H1/08(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种生产酵母核糖核酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:A、取酵母泥,干燥,加水配置成10%浓度酵母粉浆,调节pH至2.0‑4.0;B、将酵母粉浆调节pH至7.0‑8.0,加热至高温提取2‑3小时;C、再降温至常温,调节pH至4.0‑5.0,分离,得到含粗RNA的轻相和含酸性蛋白及酵母细胞的脱核酵母的重相;D、将含粗RNA的轻相,调节pH至8‑10,50℃静置保温30分钟,分离,得到含RNA的轻相和含碱性蛋白及酵母细胞的脱核酵母的重相;E、将含RNA的轻相调节pH至7.0,然后加入溶液体积4%重量的活性白土,静置;F、用压滤机压滤,滤液泵入等电点沉淀罐,加入6摩尔每升的盐酸,调节pH为2.0‑3.0,沉淀,去除上清液,用等体积pH为2.0‑3.0的酸水清洗一遍,去除上清液;G、将RNA沉淀物加水配置成3‑4%浓度RNA溶液,重复步骤F,获得粗RNA沉淀,加入乙醇,搅拌,静置,去除上清液;H、将沉淀,干燥,粉碎过80目筛得酵母核糖核酸,或将沉淀加水配制成浓度1‑4%,pH为7.0的溶液,醇沉或干燥得到核糖核酸钠盐。
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