一种鉴定肝素制品动物物种来源的方法

摘要

本发明公开了一种鉴定肝素制品动物物种来源的方法。该方法包括如下步骤：检测待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列；将所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与动物物种的完整线粒体DNA序列进行比较，若所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与所述动物物种的完整线粒体DNA序列相同，则所述待鉴定肝素制品候选来源于所述动物物种；或将所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与动物物种的完整线粒体DNA序列中的保守区序列进行比较，若所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与所述动物物种的完整线粒体DNA序列中的保守区序列相同，则所述待鉴定肝素制品候选来源于所述动物物种。本发明方法具有操作简单、鉴定快速的特点，在肝素制品的鉴定领域将有广阔的应用前景。

主权项

一种鉴定肝素制品动物物种来源的方法，包括如下步骤：检测待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列，包括如下步骤1)和步骤2)：1)将所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与牛和羊的完整线粒体DNA序列中的保守区序列进行比较，若所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与所述牛的完整线粒体DNA序列中的保守区序列不相同且与所述羊的完整线粒体DNA序列中的保守区序列不相同，则所述待鉴定肝素制品为非羊源肝素制品也非牛源肝素制品；若所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与所述牛的完整线粒体DNA序列中的保守区序列相同且与所述羊的完整线粒体DNA序列中的保守区序列相同，则所述待鉴定肝素制品候选为含有牛羊源肝素制品；2)将所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与猪的完整线粒体DNA序列中的保守区序列进行比较，若所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与所述猪的完整线粒体DNA序列中的保守区序列不相同，则所述待鉴定肝素制品为非猪源肝素制品；若所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与所述猪的完整线粒体DNA序列中的保守区序列相同，则所述待鉴定肝素制品候选为含有猪源肝素制品；所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列按照如下方法获得：以所述待鉴定肝素制品中的DNA为模板，PCR扩增，得到PCR扩增产物，将所述PCR扩增产物进行测序，得到所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列；当将所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与猪的完整线粒体DNA序列中的保守区序列进行比较时，所述PCR扩增中使用的引物对为：一条引物序列如序列表中序列4所示；另一条引物的序列如序列表中序列5所示；当将所述待鉴定肝素制品中的线粒体DNA序列与牛和/或羊的完整线粒体DNA序列中的保守区序列进行比较时，所述PCR扩增中使用的引物对为：一条引物序列如序列表中序列6所示；另一条引物的序列如序列表中序列7所示。