基因转运载体的制备方法

摘要

本发明的目的在于提供一种有效地制备基因转运载体的方法，该方法中，经由转化而导入的基因所表达的蛋白质活性和表达效率均良好。此外，本发明的另一个目的是提供含有该制备方法制备的基因转运载体的药物组合物，以及含有该耐受菌的实体瘤治疗剂。本发明通过以下方案来解决本发明的课题：在由厌氧性微生物形成的基因转运载体中，使编码前述目标蛋白质的DNA 5′末端侧，进一步具有含有碱基序列的DNA片段，所述碱基序列编码由组蛋白样DNA结合蛋白N末端的第1位到至少第4位氨基酸序列构成的肽，所述厌氧性微生物可以在处于厌氧环境下的肿瘤组织内生长，并且能够表达（A）具有抗肿瘤活性的蛋白质、或（B）具有将抗肿瘤物质前体转化为抗肿瘤物质的活性的蛋白质。

主权项

DNA片段，该DNA片段具有含有来源于选自青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、嗜热双歧杆菌、假长双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌以及长双歧杆菌的任意一种的双歧杆菌属细菌且编码组蛋白样DNA结合蛋白的基因的启动子和终止子的DNA片段，在所述启动子和终止子之间具有编码胞嘧啶脱氨酶的DNA，所述编码胞嘧啶脱氨酶的DNA是，（a）除去序列号28的氨基酸序列的起始蛋氨酸的氨基酸序列，并且编码序列号28中记录的大肠杆菌CD的氨基酸序列中与第315位相对应的氨基酸天冬氨酸被丙氨酸取代的氨基酸序列的碱基序列；（b）在编码胞嘧啶脱氨酶的DNA的5′末端侧，具有编码序列号29的第1位到第4～18位中任意一位的氨基酸序列的碱基序列。