发明名称 |
H1N1、PRRSV、O-FMDV四重检测试剂盒 |
摘要 |
本发明公开了一种四重同步核酸定量检测试剂盒,属于生物技术领域。本试剂盒包括PCR反应液,其中包括DEPC处理水、Taq酶、M-MLV反转录酶、RNase抑制剂、dNTPMix、10×一步法RT-PCRBuffer、MgCl2溶液,SEQIDNo.1~13所示的针对H1N1流感病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒及O型口蹄疫病毒的引物和探针;试剂盒中还包括RNA提取液、阴性质控品、工作标准品、阳性质控品和临界阳性质控品。本发明采用实时荧光定量PCR技术定量检测甲型H1N1流感病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒及O型口蹄疫病毒病毒核酸,具有特异、灵敏、快速、操作简便的优点。 |
申请公布号 |
CN102676691A |
申请公布日期 |
2012.09.19 |
申请号 |
CN201110336914.1 |
申请日期 |
2011.10.31 |
申请人 |
武汉大学 |
发明人 |
胡萌;王业富 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 |
代理人 |
薛玲 |
主权项 |
一种甲型H1N1流感病毒、高致病性猪繁殖与综合征病毒及O型口蹄疫病毒核酸定量检测引物和探针,包括如下的序列组:1)包括下述正向引物,反向引物和荧光探针的四组序列: a)针对甲型H1N1流感病毒matrix基因正向引物:5'‑ CATGGARTGGCTAAAGAC ‑3',反向引物:5'‑ WAGGGCATTTTGGACAAA ‑3',荧光探针:5'‑ ccaAtcTtgTcaCctct ‑3',下标为LNA修饰;b)针对甲型H1N1流感病毒haemagglutinin基因正向引物:5'‑ TGCTGGATCTGGTATTATC ‑3',反向引物:5'‑ ATCGGATGTATATTCTGAAATG ‑3',荧光探针:5'‑ tcaGatAcaCcaGtccac ‑3' ,下标为LNA修饰;c)针对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因正向引物:5'‑ CTTYCTTCTGGACACTAAG ‑3',反向引物:5'‑ CTCTGGTTAWAGGGGTTG‑3',荧光探针:5'‑ aacCrtCaaGcaCaactc ‑3' ,下标为LNA修饰;d)针对O型口蹄疫病毒VP1基因正向引物:5'‑ GTGACCTTCAAGTGTTRG ‑3',反向引物:5'‑GGCCCTCTTCATGCGGTA ‑3',5’‑ GGCTCTCTTCATTCTGTA ‑3'荧光探针:5'‑ ctgCctAccTccTtcaac ‑3' ,下标为LNA修饰;2)上述1)中序列的5’端和/或3’端有延长的核苷酸片段的一组序列;3)与上述1)或2)中序列的同源性大于85%,且具有特异性的一组序列;4)与上述1)或2)或3)中序列的碱基互补的一组序列;5)上述1)、2)和3)中任何三个或多个序列形成的具有正向引物、反向引物以及与之向对应的荧光探针的分别对应上述a)~d)中所述基因的四组序列;其中,所述4种探针分别使用四种激发不同荧光信号的荧光基团;所述序列中, Y为C或T,R为A或G,W为A或T。 |
地址 |
430072 湖北省武汉市武昌区珞珈山武汉大学 |