三七总皂苷的微生物发酵提取方法

摘要

本发明公开了一种三七总皂苷的微生物发酵提取方法，包括以下步骤：1）、微生物固态发酵：将三七根粉与麸皮按1.5~4:1的重量比混合后作为发酵基质，在灭菌后发酵基质中加入灭菌后磷酸盐缓冲溶液，得发酵底物；在发酵底物中加入枯草芽孢杆菌的菌液，培养，得发酵曲；2）、三七总皂苷的提取：将发酵曲用乙醇溶液回流提取，所得的残渣重复用乙醇溶液回流提取；合并两次回流提取所得的上清，得三七总皂苷提取液。本发明的三七总皂苷的微生物发酵提取方法，具有反应条件温和、提取效率高、能增加稀有皂苷成分提取量的特点。

主权项

三七总皂苷的微生物发酵提取方法，其特征是包括以下步骤：1）、微生物固态发酵：将三七根粉与作为营养辅料的麸皮按1.5~4:1的重量比混合后作为发酵基质，将发酵基质进行灭菌，得灭菌后发酵基质；将pH=7~8、且浓度为0.2 mol/L的磷酸盐缓冲溶液进行灭菌，得灭菌后磷酸盐缓冲溶液；按照每g发酵基质配用1~1.4ml的pH=7~8、且浓度为0.2 mol/L的磷酸盐缓冲溶液的比例；在灭菌后发酵基质中加入灭菌后磷酸盐缓冲溶液，得发酵底物；然后在无菌条件下进行以下操作：按照每g发酵基质配用0.1~0.2 mL枯草芽孢杆菌的菌液的接种量，在发酵底物中加入枯草芽孢杆菌的菌液，搅拌均匀后，于34.8~35.2℃培养90~100h，得发酵曲；2）、三七总皂苷的提取：将发酵曲用体积浓度为68~72%的乙醇溶液回流提取，所述乙醇溶液与步骤1）中的发酵基质的用量比为：7.5~8.5ml的乙醇溶液/g发酵基质；回流提取时间为1.2~1.8h；回流提取结束后，离心，分别得首次上清和残渣；将残渣用体积浓度为68~72%的乙醇溶液回流提取，所述乙醇溶液与步骤1）中的发酵基质的用量比为：4.5~5.5ml的乙醇溶液/g发酵基质；回流提取时间为1.2~1.8h；回流提取结束后，离心，得二次上清；合并首次上清和二次上清，得三七总皂苷提取液。