微生物发酵生产乙酰胆碱酯酶的方法

摘要

本发明所述的一种微生物发酵生产乙酰胆碱酯酶(简写为AChE)的方法是将产生AChE的微生物进行6～10次活化，再经过产物定向驯化4～6次，使其在24～30℃环境条件下生长良好；按常规方法将产物定向驯化后的AChE产生菌在24～30℃逐级扩大培养，按发酵液体积的3～9％接种量接入液体发酵培养基中，在24～30℃培养60～114h时，即微生物发酵生产AChE结束；发酵液在4,000～8,000rpm离心收集液体，收集的液体即为粗酶液；根据不同需要和使用对象不同，可以将粗酶液进一步浓缩、分离纯化，制备成不同活性、纯度和剂型的酶制剂。

主权项

一种微生物发酵生产乙酰胆碱酯酶(简写为AChE)的方法，其包括以下步骤：(1)将产生AChE的微生物进行6～10次活化，再经过产物定向驯化4～6次，使其在24～30℃环境条件下生长良好；(2)按常规方法将产物定向驯化后的AChE产生菌在24～30℃逐级扩大培养，制备成液体一级种子和二级种子；(3)将液体一级种子或二级种子，按发酵液体积的3～9％接种量接入液体发酵培养基中，在28～30℃培养60～114h时，即微生物发酵生产AChE结束；(4)将(3)的发酵液在4,000～8,000rpm离心收集到的液体，即为粗酶液；(5)根据不同需要和使用对象不同，将(4)得到的粗酶液进一步浓缩、分离纯化，制备成不同活性、纯度和剂型的酶制剂。