发明名称 |
一种产磷脂酶A<sub>2</sub>的工程菌及其应用 |
摘要 |
本发明公开了一种产磷脂酶A2的工程菌及其应用,其步骤:A、磷脂酶A2基因的制备:PCR引物的设计及磷脂酶A2基因片段的扩增;以扩增出的片段plaT为探针克隆含磷脂酶A2基因(序列为SEQIDNO.2)的DNA片段。B、重组质粒的构建:将含有磷脂酶A2基因大小为3kb的BamH1酶切片段克隆到高拷贝质粒pHZ132上,得到重组质粒pLH001; C、工程菌的构建:用原生质体转化的方法将质粒pLH001导入宿主菌变铅青链霉菌1326,得到工程菌变铅青链霉菌LH001。该工程菌稳定性好,导入的质粒不易丢失。液体发酵能产生分泌型有活力的磷脂酶A2(氨基酸序列为SEQIDNO.1),发酵液中酶活力≥2,000U/mL,产酶能力优于现有水平。可应用于植物油脂脱胶、溶血磷脂制备等领域。 |
申请公布号 |
CN102226165B |
申请公布日期 |
2012.09.05 |
申请号 |
CN201110101940.6 |
申请日期 |
2011.04.22 |
申请人 |
华中农业大学 |
发明人 |
李维琳 |
分类号 |
C12N1/21(2006.01)I;C11B3/00(2006.01)I;C12P9/00(2006.01)I;C12R1/465(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/21(2006.01)I |
代理机构 |
武汉宇晨专利事务所 42001 |
代理人 |
王敏锋 |
主权项 |
一种产磷脂酶A2的工程菌,其特征在于:变铅青链霉菌LH 001(Streptomyce , livdans LH 001),CCTCC No:M2011096。 |
地址 |
430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号 |