发明名称 一种分离培养肝脏原代细胞的方法
摘要 本发明提供一种分离培养肝脏原代细胞的方法,包括以下步骤:1)从肝脏的肝门静脉输入灌流液;2)输入胶原酶灌流液;3)将消化成熟的肝脏浸泡于胶原酶灌流液中;4)加清洗液终止消化,过滤,收集肝细胞悬液;5)离心,弃上清,用完全培养基重悬,培养。本发明方法操作简单,成本低,稳定高效,肝细胞得率高,活力高,易贴壁。此法可在实验室推广,成为科学研究的常规方法。
申请公布号 CN102634480A 申请公布日期 2012.08.15
申请号 CN201210083696.X 申请日期 2012.03.27
申请人 中国农业大学 发明人 方美英;董新星;陈刚;白莹;陈洁
分类号 C12N5/071(2010.01)I 主分类号 C12N5/071(2010.01)I
代理机构 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人 王朋飞;王加岭
主权项 一种分离培养肝脏原代细胞的方法,包含以下步骤:1)从离体肝脏的肝门静脉输入灌流液,所述的灌流液,其1L配方为:NaCl 8‑9.4g,KCl 0.2‑0.4,HEPES 2.4‑4.8g,双蒸水定容至1L,pH值7.2‑7.4;2)输入胶原酶灌流液,肝组织呈龟背状裂开后,停止灌流;3)将消化成熟的肝脏浸泡于胶原酶灌流液中;4)加清洗液终止消化,过滤,收集肝细胞悬液;5)离心,弃上清,用完全培养基重悬培养。
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