一种螺旋藻多糖及其提取方法

摘要

本发明是一种螺旋藻多糖及其提取方法。按以下步骤进行： 1）取螺旋藻生药材 ，用工业乙醇室温下浸泡七天，倾去乙醇，固体物晾干，然后用沸水进行多次提取，流动水透析2天，透析内液浓缩后离心，加入三氯乙酸溶液去除蛋白，加NAOH溶液中和至pH值为6.5～7.5后，流动水透析、浓缩后离心，上清液加入三倍体积的工业乙醇，静置过夜，离心收集沉淀，分别经无水乙醇和丙酮洗涤后，干燥，得水提螺旋藻粗多糖；2）固体残渣碱提得碱提螺旋藻粗多糖；粗多糖经分离、洗脱后得纯多糖。螺旋藻多糖化学结构特征为：主链由1,4-连接α-D-葡萄糖构成，平均每8个主链残基上有一个分支，取代在分支点的6位，分支由1个或2个1®6连接的葡萄糖构成。本发明的螺旋藻多糖的提取方法简单，方便，重现性好。

主权项

一种螺旋藻多糖的提取方法，其特征在于按以下步骤进行： 1）取螺旋藻生药材，加质量浓度 95%工业乙醇室温下浸泡七天，倾去乙醇，固体物晾干，然后用沸水进行多次提取，每次提取时间为4小时，用苯酚‑硫酸法检测提取液的糖含量，至糖反应不明显为止，每次的提取液经过滤后合并，加热浓缩至小体积，对流动水透析2天，透析内液浓缩后离心，加入质量浓度30%的三氯乙酸(体积比，1：1 v/v)溶液去除蛋白，在4度条件下反应4小时，加质量浓度10% NAOH溶液v/v中和至pH值为6.5～7.5后，扎袋对流动水透析48小时，透析内液浓缩后离心，上清液加入三倍体积的质量浓度95%工业乙醇，静置过夜，离心收集沉淀，分别经无水乙醇和丙酮洗涤后，于80 ℃干燥，得水提螺旋藻粗多糖；2）沸水提取后的固体残渣在4 ℃下用5% v/v NaOH溶液浸提3小时，间歇搅拌，过滤，用10% v/v HCl溶液中和至pH 6.5～7.5，扎袋对流动水透析2天，透析内液浓缩后离心，上清液加入三倍体积的 v/v 95%工业乙醇沉淀，静置过夜，离心收集沉淀，分别经无水乙醇和丙酮洗涤后，于80 ℃干燥，得碱提螺旋藻粗多糖；3）水提螺旋藻粗多糖用DEAE‑纤维素阴离子交换柱层析进行分离，用去离子水和不同离子强度0.1，0.2，0.3和0.5 mol/L的NaCl溶液进行分步洗脱，分别从去离子水、0.1、0.2，0.3和0.5 mol/L NaCl溶液的洗脱液中分离得到五个组分，洗脱液对去离子水透析，透析内液减压浓缩并冷冻干燥，所得产物分别命名为LXZ‑W，LXZ‑0.1，LXZ‑0.2，LXZ‑0.3，LXZ‑0.5，取LXZ‑W样品用0.2mol/L氯化钠溶解，离心，上清液上S‑300凝胶柱，用0.2 mol/L氯化钠洗脱液洗脱得LXZ‑W‑300组分，经HPLC检测为一纯多糖，分子量在3～10 × 104 Da。