一种无需裂解高效提取发酵细菌中外源表达蛋白的方法

摘要

本发明公开一种无需裂解高效提取发酵细菌中外源表达蛋白的方法，将发酵细菌菌液离心10-60min，离心速度为：6000-10000g，离心温度为4℃，留取上清液；将离心沉积物悬浮于缓冲液中形成混合液，将混合液在4-25℃下温和搅拌5-60min, 24小时后，在4-20℃下，静置1-24h；最后将得到发酵细菌菌液离心10-60min，离心速度为：6000g-10000g，离心温度为4℃；留取上清液体，合并上清液，作为合成蛋白产物。本发明在不对细菌细胞进行裂解操作的前提下，高效提取细菌发酵工艺过程中所表达、滞留于细菌胞质空间中的外源蛋白，使用材料成分简单，操作过程简洁，综合生产成本低。

主权项

一种无需裂解高效提取发酵细菌中外源表达蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）制备缓冲液：将乙二胺四乙酸钠1.0mmol‑ 500mmol、尿素1.0mol‑ 10.0mol、蔗糖0.1mmol‑ 5mmol、Tris碱10‑100mmol/L，均匀混合。