一种福建山樱花体细胞胚胎发生方法

摘要

本发明公开了一种福建山樱花体细胞胚胎发生方法，该方法包括：在诱导培养基上诱导未成熟胚的胚性愈伤组织、采用增殖培养基进行胚性愈伤组织增殖、采用培育培养基和生长培养基分别进行胚状体的发育和成熟，直至长成完整小苗。本发明的福建山樱花体细胞胚胎发生技术为福建山樱花的大规模无性繁殖育苗提供一种周期短、繁殖率高、成本低廉的方法，有效解决了福建山樱花现存林分极为稀少、种子成熟时极易爆裂、种子的采收贮存与发芽极为困难、传统育种方法困难、且育种效率低，无法满足园林绿化及生产需要问题。

主权项

一种福建山樱花体细胞胚胎发生方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)春季采集福建山樱花的未成熟果实，先用流水冲洗2h，然后在无菌条件下切开种皮，取出两片子叶和未成熟胚接到诱导培养基，控温23℃，培养半个月，得胚性愈伤组织；其中，诱导培养基采用MS培养基，在其中附加：1.0～4.0mg/L 2，4‑D、0.2～1.0mg/L BA、500mg/L水解酪蛋白、10mg/L维生素C、30g/L蔗糖和6g/L琼脂，pH5.8；(2)将步骤(1)的胚性愈伤组织转入增殖培养基，控温23℃，暗培养至产生胚状体；其中，增殖培养基采用MS或1/2MS培养基，在其中附加：0.5～1.0mg/L 2，4‑D、0.2～0.5mg/LBA、500mg/L水解酪蛋白、10mg/L维生素C、30g/L蔗糖和6g/L琼脂，pH5.8；(3)将步骤(2)的胚状体转入培育培养基，控温22～27℃，光照12h·d‑1，光照度为1200lx，光培养至长出幼苗；其中，培育培养基采用MS培养基，在其中附加：10mg/L维生素C、蔗糖30g/L和琼脂6g/L，pH5.8；(4)将步骤(3)的幼苗转入生长培养基，培养至长成完整小苗；其中，生长培养基采用MS培养基，在其中附加：10mg/L维生素C、蔗糖20g/L和琼脂6g/L，pH5.8。