一种高效稳定的稻曲病菌室内接种方法及专用菌株

摘要

本发明属于植物保护技术领域，具体涉及一种室内高效稳定的稻曲病菌人工接种方法及专用菌株。发明的方法包括：通过PSB振荡培养1块在PSA上培养7天的菌丝块(6mm)7-10天制备菌丝孢子混合液，4层纱布过滤后获得106个/ml孢子液接种体；在水稻幼穗分化第七期以注射方式接种水稻穗苞；25℃、95％RH条件下保湿3天后置于25-32℃、90％-98％RH的喷灌网室内培养。采用本发明可使稻曲病人工接种病穗率达到90％以上，与室外的人工接种技术相比，本发明能够在可控的条件下获得高效的稳定的稻曲病发病率。

主权项

一种高效稳定的稻曲病菌的室内接种方法，其特征在于，它包含下列步骤：1)取直径为6mm的PSA培养基上培养7天的保藏号为CCTCC NO：M2011023号的稻曲病菌HWD‑2的菌丝块1块，放入200mlPSB培养基中，置于28℃、转速180rpm的摇床上振荡培养7‑10天，将所得的菌丝孢子混合液经四层纱布过滤，取滤液，于3000rmp下离心5min，弃上清，沉淀用新鲜的PSB培养基悬浮并将孢子终浓度稀释至106个/ml，即得薄壁分生孢子液；2)在水稻幼穗分化第7期，用10ml注射器从穗苞中上部插入，向穗苞内注射制备好的薄壁分生孢子液2ml，直至接种液从穗苞顶部溢出；3)将接种后的水稻植株放置在植物生长箱内，于25℃、95％RH下保湿培养3天，然后移至喷灌网室，白天每2小时喷水一次，夜间每4小时喷水一次，保持温度在25‑32℃，湿度90‑98％；其中步骤1)所述的PSA培养基的组分及配比如下：按g/L计：马铃薯200g，蔗糖20g，琼脂粉12g；补充蒸馏水至1000ml；步骤1)所述的PSB培养基的组分及配比如下：按g/L计：马铃薯200g，蔗糖20g，补充蒸馏水至1000ml。