一种基于表面增强拉曼光谱的人乳腺癌细胞MCF-7的特异性检测方法

摘要

一种基于表面增强拉曼光谱的人乳腺癌细胞MCF-7的特异性检测方法，将MCF-7细胞和探针复合物Rh6G-Au-Ag-aptamer作用，其拉曼光谱出现Rh6G的特征吸收峰，采用表面增强拉曼光谱方法检测MCF-7细胞。所述的探针复合物以核酸适体S2.2为模板，采用光催化方法，在其DNA链的碱基上沉积金和银的双金属合金纳米粒子，并在其表面固载拉曼信号分子Rh6G制得。该方法基于和MCF-7细胞靶向结合且具有高的表面增强拉曼活性的探针复合物，利用适体与MCF-7细胞的特异性靶向结合能力及适体表面的合金纳米粒子对Rh6G分子拉曼信号的增强作用，对MCF-7细胞的进行特异性检测。

主权项

一种基于表面增强拉曼光谱的的人乳腺癌细胞MCF‑7的特异性检测方法，包括以下步骤：a）Rh 6G‑Au‑Ag‑aptamer探针复合物的合成：将序列为 5’–GCA GTT GAT CCT TTG GAT ACC CTG G–3’的核酸适体S2.2，溶解在磷酸盐缓冲溶液（PBS，pH 7.4）中，加入体积比1~5：1的NaAuCl4和AgNO3溶液，混合并搅拌均匀，在暗处4 ℃下放置12小时以上，置于紫外灯下光照5 min至60 min，形成Au‑Ag‑aptamer纳米复合物；将Rh 6G溶液加入到Au‑Ag‑aptamer纳米复合物分散液中，避光搅拌后离心处理，用PBS洗涤除去未吸附的Rh 6G分子，得到探针复合物，标记为Rh 6G‑Au‑Ag‑aptamer；b）Rh 6G‑Au‑Ag‑aptamer探针复合物与细胞作用：将步骤a）制得的纳米探针复合物分散成均相溶液，加入到MCF‑7细胞中，在室温下孵育后，用PBS洗涤细胞除去未和细胞作用的探针复合物；c）拉曼光谱检测MCF‑7细胞：将上述步骤b）中和探针复合物作用后的细胞用胰蛋白酶溶液消解，用PBS溶液制得细胞悬液，将其滴涂到新鲜制备的云母片表面，采用表面增强拉曼光谱方法检测MCF‑7细胞。