利用间歇浸没式生物反应器进行甘蔗组织培养快繁

摘要

本发明提供了一种利用间歇浸没式生物反应器进行甘蔗组织培养快繁的方法，其特征在于它是利用经过脱毒处理的甘蔗茎尖组织诱导芽培养数代后为材料，转接到间歇浸没式生物反应器中进行增殖培养和生根培养。间歇浸没式生物反应器中培养温度在29℃，光照1500Lx，16小时光照，间歇培养条件为每3小时培养3分钟，生根为每6小时培养3分钟，一代可以增殖达40倍，生根完成后经过适当炼苗处理，开始移植，其成活率85％左右。该套系统自动化程度高，增殖速度远高于传统组培方法，节省劳动成本、增加经济效益。

主权项

一种利用间歇浸没式生物反应器进行甘蔗组织培养快繁的方法，其特征是：1)材料选取：选用甘蔗茎尖脱毒培养的第五代或第六代组培苗为材料，所述甘蔗是指新台糖22、新台糖16和Badila这三个甘蔗品种；2)切取材料、接种：选取粗壮、基部干净的的组培苗作为接种材料，在切取材料的时候把组培苗的老叶剥落，留新叶1～2cm，被酚侵害的发黑或者变黄的叶片完全去除，但不能破坏组培苗的生长点和基部的芽点，接种密度为70ml～100ml/株；3)增殖培养：将切取好的单个甘蔗组培苗转接到间歇浸没式生物反应器中进行增殖培养，接种于配方为MS+6‑BA0.6mg/L+NAA0.1mg/L+20g/L白砂糖、pH值为6.2的液体培养基中，培养条件为温度29℃，光照1500Lx，16小时光照，8小时黑暗，间歇培养的间歇频率为每3小时一次，培养时间为3分钟，连续培养30天；4)生根培养：待增殖培养结束后，更换生根培养基，甘蔗生根培养基的配方为；MS+6‑BA0.01mg/L+NAA2.0mg/L+活性炭50mg/L+20g/L白砂糖，培养基pH值为6.2，培养条件为温度29℃，光照1500Lx，16小时光照，8小时黑暗，间歇培养的间歇频率为每6小时一次，培养时间为3分钟，连续培养20天；5)生根苗驯化及移栽：生根结束，在炼苗大棚中摆放3～5天后移栽，移栽时用清水洗干净根部，开始移栽是用沙培，盖塑料薄膜5天，揭膜后每星期喷施一次0.2％的甘蔗专用复合肥，40天后移栽至营养钵中，在营养钵中育苗一个月左右移栽至大田。