一种采用荧光RT-PCR技术检测牙鲆TLR21基因表达的方法

摘要

本发明公开了一种采用荧光RT-PCR技术检测牙鲆TLR21基因相对表达量的方法。本发明中牙鲆TLR21基因实时荧光RT-PCR检测方法的建立，为研究牙鲆TLR21基因表达调控机理及免疫学功能奠定基础。TLR21参与鱼类免疫调节，通过感知病原微生物体，识别病原相关分子模式，激活天然免疫系统，TLR21基因的表达丰度在一定程度上反映了牙鲆免疫系统的活度，可以作为牙鲆疾病防治中免疫监测指标。通过检测牙鲆TLR21基因表达量的变化，可以提早判断牙鲆是否感染病原，及时采取预防治疗措施，避免势态严重发展造成不可挽回的损失。本发明为在mRNA水平对TLR21的相对定量分析提供了技术平台。

主权项

一种采用荧光RT‑PCR技术检测牙鲆TLR21基因表达的特异性引物，其特征在于包括符合荧光PCR反应特点的特异性上下游引物：TLR21‑q‑F：5'‑TAAACTTTGCCTACATCACA‑3'；TLR21‑q‑R：5'‑ AACACGAGCAGAAGAACAT ‑3'；以及作为内参基因的牙鲆β‑actin基因特异性上下游引物：β‑actin‑F：5'‑AGGTTCCGTTGTCCCG‑3';β‑actin‑R：5'‑TGGTTCCTCCAGATAGCAC‑3'。