| 摘要 |
1. Способ получения антиген-нагруженной CD40-положительной антигенпрезентирующей клетки, включающий стадии: ! (i) контактирования CD40-положительной антигенпрезентирующей клетки, выделенной У пациента, инфицированного HCV, с полипептидом, содержащим ! (a) домен рецептора коксакивируса и аденовируса (CAR), способный связываться с аденовирусным фибриллярным белком или с его функциональным вариантом, ! (b) мотив тримеризации и ! (c) лиганд CD40 человека, ! и аденовирусом, кодирующим антиген, где указанное контактирование может проводиться путем отдельного добавления полипептида и аденовируса или путем добавления предварительно сформированного комплекса полипептид-аденовирус, ! (ii) подержания смеси, полученной на стадии (i), в условиях, подходящих для образования тройного комплекса между указанным полипептидом, указанным аденовирусом и указанной клеткой, и ! (iii) поддержания клеток в условиях, подходящих для интернализации, процессинга и презентирования одного или нескольких пептидов, полученных из антигена. ! 2. Способ по п.1, где домен CAR содержит эктодомен CAR, предпочтительно аминокислоты 1-236 SEQ ID NO:1. ! 3. Способ по п.1 или 2, где лиганд CD40 человека содержит аминокислоты 118-231 SEQ ID NO:6. ! 4. Способ по п.1 или 2, где мотив тримеризации содержит фрагмент белка фибритина бактериофага T4. ! 5. Способ по п.4, где фрагмент белка фибритина бактериофага Т4 содержит SEQ ID NO: 4. ! 6. Способ по п.1 или 2, дополнительно включающий метку. ! 7. Способ по п.6, где метка представляет собой полигистидиновую метку, предпочтительно гексагистидиновую метку. ! 8. Способ по п.1 или 2, дополнительно включающий пептидный линкер на С-конце эктодомена CAR. ! 9. Способ по п.8, отлича |
