摘要 |
Composición de adenovirus, que puede obtenerse mediante un método que comprende las siguientes etapas en ese orden: a) hacer crecer células huésped proporcionando nutrientes a las células huésped mediante perfusión con un medio que contiene glucosa, en el que se regula la tasa de perfusión del medio para controlar la concentración de glucosa desde 1 g/l hasta menos de 2 g/l; b) infectar dichas células huésped con un adenovirus; c) recoger y lisar dichas células huésped usando Tween-20 al 1%, d) clarificar y filtrar el producto de la etapa c), e) concentrar y diafiltrar la disolución de virus usando una membrana de TFF de 300K de NMWC f) tratar la disolución de virus de la etapa e) con Benzonase® 100 U/ml durante la noche a temperatura ambiente en presencia de NaCl 1 M, g) someter la disolución de virus diluida de la etapa f) a cromatografía de intercambio aniónico usando una columna Toyopearl Super Q 650 M, y usando al siguiente sistema de tampón: tampón de carga: Tris 20 mM + MgCl2 1 mM + NaCl 0, 3 M, pH>=9, 00, tampón de elución: Tris 20 mM + MgCl2 1 mM + NaCl 2 M, pH>=9, 00 h) concentrar y diafiltrar la disolución de virus de la etapa g) usando una membrana de TFF de 300K de NMWC.
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